TRB3與糖尿病心肌病的相關(guān)性及其機(jī)制研究.pdf

1、第一部分 TRB3與糖尿病心肌病的相關(guān)性研究
　　 目的:探討TRB3在糖尿病大鼠心肌組織中的表達(dá)及與心肌細(xì)胞凋亡和間質(zhì)纖維化的相關(guān)性。
　　 方法:24只SD雄性大鼠隨機(jī)分正常對(duì)照組12只,糖尿病組12只。采用一次性腹腔注射大劑量STZ腹腔注射的方法,建立糖尿病大鼠模型。模型建成后兩組均予以普通飲食喂養(yǎng)。成模8周后,檢測(cè)空腹血糖和糖化血紅蛋白,HE染色觀察心肌組織病理改變,Masson染色觀察心肌組織間質(zhì)膠原含量,Tu

2、nel觀察心肌細(xì)胞凋亡情況,熒光定量PCR、Western Blot分別檢測(cè)心肌組織TRB3 mRNA及蛋白水平的變化。
　　 結(jié)果:與對(duì)照組相比,糖尿病組大鼠空腹血糖及糖化血紅蛋白水平明顯升高(P＜0.01);心肌細(xì)胞排列紊亂,肌纖維溶解、萎縮、斷裂,炎癥細(xì)胞浸潤(rùn);間質(zhì)膠原表達(dá)增加(P＜0.01);心肌細(xì)胞凋亡明顯增多(P＜0.01);心肌組織TRB3 mRNA及蛋白水平表達(dá)升高(P＜0.01),糖尿病組心肌組織TRB3 mR

3、NA是對(duì)照組的5.66倍。相關(guān)性分析顯示,TRB3蛋白表達(dá)與心肌細(xì)胞凋亡成正相關(guān)(r=0.668,P＜0.05),與間質(zhì)纖維化程度成正相關(guān)(r=0.595,P＜0.05)。
　　 結(jié)論:糖尿病大鼠心肌組織中TRB3 mRNA及蛋白表達(dá)增多。TRB3可能通過(guò)促進(jìn)心肌細(xì)胞凋亡,增加間質(zhì)纖維含量參與糖尿病心肌病的發(fā)病機(jī)制。
　　 第二部分高糖對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞TRB3表達(dá)和細(xì)胞凋亡的影響及機(jī)制
　　 目的:觀察高糖對(duì)人

4、臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)TRB3表達(dá)變化和細(xì)胞凋亡的影響,探討其可能的機(jī)制。
　　 方法:調(diào)整培養(yǎng)液葡萄糖濃度,將HUVECs分成如下幾組:5.5mmol/L、15 mmol/L、25 mmol/L、35mmol/L組及5.5mmol/L組、25mmol/L組、25mmol/L+DMSO組、25mmol/L+P38MAPK特異性阻斷劑SB203580組。應(yīng)用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率,熒光定量PCR檢測(cè)TRB3mRNA水平

5、的變化,Western Blot檢測(cè)TRB3蛋白水平的變化。
　　 結(jié)果:與5.5mmol/L組相比,15mmol/L、25mmol/L、35mmol/L組細(xì)胞凋亡及TRB3蛋白表達(dá)明顯增加(P＜0.05)。隨著培養(yǎng)液葡萄糖濃度增高,HUVECs細(xì)胞凋亡及TRB3表達(dá)逐漸增加,各組之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。阻斷劑SB203580預(yù)處理細(xì)胞1h后,能阻斷25mmol/L引起的細(xì)胞凋亡以及TRB3表達(dá)變化(P＜0.05