檸條根系內(nèi)生解磷菌研究及根圍土壤古細菌分析.pdf

1、磷是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)可持續(xù)發(fā)展的“瓶頸”元素之一，但是依靠磷肥來解決磷元素匱乏又存在著諸多弊端，因此利用解磷微生物為生產(chǎn)生物磷肥奠定基礎(chǔ)就成為一熱點，備受人們關(guān)注。目前人們對分離自各種土壤、水體、植物根際、磷礦區(qū)以及其它特殊生境中的解磷微生物進行了有關(guān)解磷效應(yīng)、解磷機制及其應(yīng)用效果等方面的研究，關(guān)于來源于植物內(nèi)生的具有溶磷效果的細菌的報道還不多。檸條在我國中西北地區(qū)鹽堿灘地植被恢復(fù)和水土保持與荒漠化防治中檸條已發(fā)揮了巨大的價值。本研究以檸條根系

2、內(nèi)部分離到的四株解磷內(nèi)生細菌為研究對象，C9、C5和C7為成團泛菌(Pantoea)，X6為假單胞菌(Pseudomonas)。在無機磷液體培養(yǎng)基培養(yǎng)的條件下，周期取樣，利用鉬銻抗比色法測定它們的解磷能力，同時檢測溶液pH變化，結(jié)果表明C9菌株的解磷能力最強，隨著時間的延長，溶液中的速效磷含量逐漸增加到4.449mg/L，而其溶液pH可降至4.22。C5和C7菌株的解磷能力相差不多，培養(yǎng)液中的有效磷含量分別可達3.076 mg/L和3.

3、026 mg/L，其溶液pH分別可降至4.88和4.77;X6培養(yǎng)液中的速效磷含量最高為2.833 mg/L，溶液pH最低僅能降至6.12。由此可見，這四株細菌都能夠把難溶性磷源轉(zhuǎn)化為植物可吸收利用的有效磷。在研究解磷能力的同時發(fā)現(xiàn)pH值和解磷能力之間具有一定的相關(guān)性。
　　 古菌兼具細菌和真核生物的某些特點，古菌和細菌同屬原核生物，但是在分類地位上，古菌和真核生物親緣關(guān)系反而更近。許多古菌能在超高溫、高酸堿度、高鹽及厭氧環(huán)境等

4、極端環(huán)境中生活，具有獨特的細胞結(jié)構(gòu)和酶作用方式。古菌主要分為兩大類:廣域古菌(Euryarchaeota)和泉古生菌(Crenarchaeota)。近年來古細菌在理論和應(yīng)用研究領(lǐng)域內(nèi)備受關(guān)注。本研究以大同盆地的檸條林土壤和鹽堿地土壤作為研究對象，提取兩種土壤的總DNA，利用古細菌特異引物PCR擴增古細菌16S rDNA，構(gòu)建16S rDNA克隆文庫，測序分析。通過NCBI blast比對，對測序所得的16S rDNA序列進行系統(tǒng)發(fā)育分析

5、，比較檸條土壤和鹽堿土壤古菌物種多樣性和群落結(jié)構(gòu)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，檸條根圍土壤古菌192個克隆子中分為48個OTUs，其中33個(69％)屬于未分類的古菌界(unclassified Archaea)，9個(19％)屬于嗜泉古菌界(Crenarchaeote)，6個(12％)屬于廣域古菌界(Euryarchaeote)。鹽堿地192個克隆子分為47個OTUs，31個(70％)個屬于未分類的古菌界(unclassifiedArchaea)，7個