酶法制備絲素肽-含銀介孔生物玻璃復(fù)合材料的結(jié)構(gòu)與止血性能研究.pdf

1、在戰(zhàn)場(chǎng)上和在日常事故當(dāng)中，不受控制的出血是導(dǎo)致死亡的主要原因。因此研究新型止血材料并如何快速有效的止血一直以來(lái)都是非常熱門的話題。絲素蛋白是一種天然纖維材料，具有人體中必要的數(shù)種氨基酸，對(duì)機(jī)體無(wú)毒、無(wú)刺激作用，可生物降解;此外絲素蛋白還可以根據(jù)需要加工成各種形態(tài)的材料，通過(guò)不同的化學(xué)試劑改性，具有很大的可塑性，廣泛應(yīng)用于紡織行業(yè)、生物醫(yī)藥領(lǐng)域。為進(jìn)一步拓寬蠶絲蛋白生物醫(yī)藥材料領(lǐng)域中的應(yīng)用，本文主要研究了酶法制備絲素肽的結(jié)構(gòu)與止血性能。<

2、br>　　首先采用堿性蛋白酶Alcalase、復(fù)合風(fēng)味酶Flavourzyme、復(fù)合蛋白酶Protamex和胃蛋白酶Pepsin水解絲素蛋白，在此基礎(chǔ)上，采用堿性蛋白酶Alcalase與復(fù)合風(fēng)味酶Flavourzyme（制備的絲素肽用AF表示）、復(fù)合蛋白酶Protamex與復(fù)合風(fēng)味酶Flavourzyme（制備的絲素肽用PF表示）的組合來(lái)分步酶解絲素蛋白制備6種絲素肽。采用場(chǎng)發(fā)射掃描電子顯微鏡(FESEM)、傅里葉紅外光譜儀(FTIR)

3、、X射線衍射儀（XRD）、Zeta電位測(cè)試儀等對(duì)6種絲素肽的形貌結(jié)構(gòu)和性能進(jìn)行測(cè)試和表征。通過(guò)血液粘度實(shí)驗(yàn)、血小板粘附實(shí)驗(yàn)、體外凝血時(shí)間等體外凝血實(shí)驗(yàn)對(duì)絲素肽的止血性能進(jìn)行評(píng)價(jià)，并通過(guò)大鼠肝臟止血模型驗(yàn)證其止血效果。最后，為了進(jìn)一步提升酶解絲素肽止血材料的止血性能，將堿性蛋白酶Alcalase制備的絲素肽與含銀的介孔生物玻璃材料按5％，10％，15％，20％的比例共混制備復(fù)合止血材料，研究其結(jié)構(gòu)和止血抗菌性能。主要研究結(jié)果表明:

4、　　1、體外血液實(shí)驗(yàn)結(jié)果和大鼠肝臟止血模型表明，制備的4組絲素肽都有一定的止血效果，且止血效果比市售明膠海綿好，其中Alcalase組絲素肽止血效果最好，F(xiàn)lavourzyme組絲素肽與Protamex組絲素肽止血效果相近，Pepsin組絲素肽止血效果稍差。由于制備的4組絲素肽表面具有孔狀形貌，包含無(wú)規(guī)卷曲結(jié)構(gòu)，使得4組絲素肽具有良好的吸水性能，加速凝血。同時(shí)，4組絲素肽帶有負(fù)電勢(shì)，能夠快速激活凝血酶，縮短凝血時(shí)間，促進(jìn)凝血。
　

5、　2、雙酶制備絲素肽的止血效果比單一Flavourzyme制備絲素肽好。由于AF組絲素肽表面有很多均勻細(xì)小的孔隙，PF組絲素肽表面的孔隙較大，兩組絲素肽以β-折疊為主，包含無(wú)規(guī)卷曲結(jié)構(gòu)，使得雙酶制備絲素肽具有良好的吸水性能并帶有更大的負(fù)電勢(shì)，提高血液粘度，促使血小板在絲素肽表面聚集，有利于凝血。
　　3、復(fù)合止血材料的止血抗菌性能優(yōu)于單一Alcalase酶制備絲素肽。加入含銀介孔生物玻璃后，復(fù)合止血材料表面逐漸變的粗糙，孔隙增多，