上轉(zhuǎn)換納米顆粒的合成、修飾及其在免疫試紙條上的應(yīng)用.pdf

1、自二十世紀(jì)90年代末開(kāi)始，上轉(zhuǎn)換納米材料的領(lǐng)域不斷發(fā)展，并逐步變成納米科學(xué)最活躍的研究領(lǐng)域之一。在過(guò)去20年里發(fā)表的大量上轉(zhuǎn)換納米材料的論文證明，很多研究團(tuán)隊(duì)在這個(gè)領(lǐng)域做出了大量努力。上轉(zhuǎn)換納米材料在近紅外光激發(fā)下，可以發(fā)射出紫外、可見(jiàn)或近紅外光，即反St(o)kes發(fā)光。這種獨(dú)特的發(fā)光性質(zhì)，排除了生物樣品的背景熒光和來(lái)自生物系統(tǒng)的光散射，因此信噪比高。目前上轉(zhuǎn)換納米粒子可用于生物標(biāo)記、光動(dòng)力學(xué)治療和生物成像等領(lǐng)域。本論文把上轉(zhuǎn)換納米粒

2、子應(yīng)用于免疫層析技術(shù)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，這在一定程度上提高了免疫層析方法的靈敏性和檢測(cè)準(zhǔn)確性。在論文里，我們?cè)敿?xì)描述了上轉(zhuǎn)換納米粒子的合成過(guò)程和修飾方法，并把它與免疫層析技術(shù)相結(jié)合去檢測(cè)C-反應(yīng)蛋白。
　　(1)本課題組對(duì)上轉(zhuǎn)換納米材料的合成原本已有較豐富的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，在此基礎(chǔ)上，我們合成出兩種疏水的上轉(zhuǎn)換納米粒子，即藍(lán)光NaYF4∶Yb，Tm/NaYF4和綠光NaYF4∶Yb，Er/NaYF4。為方便進(jìn)一步與生物分子偶聯(lián)，我們把油溶性

3、的兩種納米粒子通過(guò)表面配體吸附法，即納米晶體表面疏水基團(tuán)和高分子疏水碳鏈之間的疏水相互作用，使納米晶體吸附上一種兩親性嵌段高分子。高分子親水的一端裸露在外面，親水端豐富的羧基增加了納米粒子的水溶性，也方便進(jìn)一步與生物分子偶聯(lián)。通過(guò)透射電鏡可以發(fā)現(xiàn)，納米粒子幾乎全部包覆上一層約2nm厚的高分子膜。通過(guò)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，證明這種表面修飾法耗時(shí)少，全程約30min，操作簡(jiǎn)單，且修飾好的納米粒子在水溶液里不易團(tuán)聚，就目前來(lái)說(shuō)，是效率較高且較容易的表面修

4、飾方法。
　　(2)免疫層析技術(shù)，是基于抗原抗體的特異性識(shí)別，通過(guò)毛細(xì)管虹吸作用，使液體樣品在試紙條上橫向流動(dòng)，液體樣品里的目標(biāo)物被分析膜上捕獲蛋白捕獲，最后通過(guò)檢測(cè)免疫試紙條的檢測(cè)線的熒光強(qiáng)弱來(lái)判斷目標(biāo)物濃度的方法。我們把上轉(zhuǎn)換納米粒子作為熒光探針應(yīng)用于免疫層析技術(shù)，再檢測(cè)人體內(nèi)C-反應(yīng)蛋白。結(jié)果表明，該方法不僅保留了免疫層析試紙條操作簡(jiǎn)單，經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的優(yōu)點(diǎn)，而且應(yīng)用上轉(zhuǎn)換納米粒子為熒光探針，提高了C-反應(yīng)蛋白的檢測(cè)靈敏度和準(zhǔn)確性