基于羅丹明結(jié)構(gòu)的比率型pH、次氯酸根熒光探針的設(shè)計、合成及應(yīng)用研究.pdf

1、細胞內(nèi)pH穩(wěn)態(tài)對維持細胞正常的生理功能具有重要作用。細胞器的內(nèi)環(huán)境有不同的pH，pH異常易引發(fā)多種生理疾病。因此，監(jiān)測細胞的pH變化具有重要意義。
　　細胞內(nèi)的次氯酸是過氧化氫與氯離子在MPO的催化下產(chǎn)生的，能對病原體的入侵起到防御作用，但次氯酸水平過量會導(dǎo)致一系列疾病。因此，生物體中次氯酸的檢測是一項意義重大的課題。
　　熒光探針是檢測細胞內(nèi)特定物質(zhì)的常用手段。羅丹明類分子具有優(yōu)良的光學(xué)性質(zhì)，且一定條件下會由螺環(huán)結(jié)構(gòu)（無熒

2、光）轉(zhuǎn)變成開環(huán)結(jié)構(gòu)（有熒光），因而被廣泛用于熒光探針的設(shè)計。單一熒光團的熒光信號易受外界因素干擾，使檢測不太準確?；诖?，我們設(shè)計在羅丹明母體中引入萘酰亞胺、香豆素?zé)晒鈭F，通過測量兩個熒光團發(fā)射強度并計算其比值分別實現(xiàn)對pH、次氯酸根的比率測定。
　　第一章，概述了熒光探針的結(jié)構(gòu)與識別機理，以及pH、次氯酸熒光探針的研究進展。
　　第二章，以萘酰亞胺為能量供體，羅丹明為能量受體，設(shè)計合成了基于FRET機理的pH熒光探針RNL

3、，適用于pH4.5-5.5這一范圍的pH比率檢測;探針含溶酶體靶向基團——4-（2-氨乙基）嗎啉，被成功用于溶酶體內(nèi)pH的測定。
　　第三章，分別以香豆素、羅丹明基團為FRET能量供體和受體，合成了比率型次氯酸根熒光探針RCP，探針水溶性較好，對次氯酸根有較高的選擇性和靈敏度。由于吡啶鹽結(jié)構(gòu)的引入，探針能夠?qū)€粒體進行靶向定位。
　　本論文的創(chuàng)新點:
　　1.基于FRET原理，以萘酰亞胺、香豆素基團為能量供體，羅丹明基