噬藻體感染對銅綠微囊藻905周期蛋白的影響.pdf

1、隨著我國工農(nóng)業(yè)的迅猛發(fā)展和城市化進程的加快，生活污水、工業(yè)廢水、農(nóng)業(yè)灌溉廢水中污染物的排放量日益增加，加上人們環(huán)保意識薄弱，湖泊富營養(yǎng)化問題日漸突出，各水系頻發(fā)水華現(xiàn)象。藻類的大量繁殖威脅著水系統(tǒng)的質(zhì)量與安全，因此水華的有效控制和治理具有重要的現(xiàn)實意義。對水華進行生物控制的微生物主要有細菌、放線菌、原生菌、真菌、噬藻體，其中噬藻體是一種能夠高效分解藍藻的病毒，對藍藻水華的治理有重要的潛在意義，近年來受到大家越來越多的關(guān)注。
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2、實驗室從太湖篩選到一株能夠感染銅綠微囊藻905的噬藻體，根據(jù)其理化性質(zhì)的研究，進一步探討了該噬藻體的感染對宿主細胞周期蛋白表達和細胞周期的影響。
　　(1)通過FeCl3化學(xué)絮凝法、超濾法、PEG6000濃縮法濃縮噬藻體，結(jié)果表明，F(xiàn)eCl3化學(xué)絮凝濃縮法濃縮噬藻體回收率為67.65％，超濾法濃縮噬藻體回收率為71.84％，PEG6000濃縮法濃縮噬藻體的回收率為48.32％。
　　(2)采用凍融法、超聲波法、研磨法對不同密

3、度破碎銅綠微囊藻905細胞進行破碎，結(jié)果表明凍融法破碎效率受細胞密度影響不大，超聲波法、研磨法隨著細胞密度的增加破碎效率略有增加。凍融四次、超聲波破碎細胞8min以后藻細胞破碎效率均可達到90％以上，研磨法研磨8min后細胞破碎率在80％左右。
　　(3)用顯微鏡對藻細胞計數(shù)、雙層平板法對噬藻體計數(shù)結(jié)果顯示，對照組中由于噬藻體失活失去感染效力，藻細胞數(shù)量持續(xù)增長，0h時藻細胞個數(shù)為2.4×106個/mL，48h后達到5.5×106

4、個/mL。試驗組中加入噬藻體后，噬藻體數(shù)量持續(xù)增長，從0h的6×105個/mL增加到48h的1.92×106個/mL;噬藻體加入初期，刺激藻細胞增殖，藻細胞的數(shù)量經(jīng)歷了緩慢增長，18h后呈顯著下降趨勢，從0h的2.25×106個/mL減少到48h的4.8×105個/mL。
　　(4)采用超濾法濃縮噬藻體，感染銅綠微囊藻905，凍融法破碎感染后的藻細胞，提取蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)印跡結(jié)果表明，噬藻體加入初期刺激了藻細胞的增殖，噬藻體可能通過