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文檔簡(jiǎn)介
1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?
青光眼是眼科常見(jiàn)疾病,其發(fā)病過(guò)程中對(duì)視神經(jīng)產(chǎn)生不可逆的損害,是全球?qū)е乱暳适У闹饕鄄≈?,僅次于白內(nèi)障,因而青光眼的防盲工作重點(diǎn)要放在早監(jiān)測(cè)早診斷早治療上(在發(fā)生明顯視神經(jīng)損害之前)。有研究表明視網(wǎng)膜細(xì)胞釋放過(guò)量的谷氨酸是導(dǎo)致青光眼的重要原因之一,青光眼視網(wǎng)膜也發(fā)現(xiàn)銅離子的蓄積,所以監(jiān)測(cè)眼部谷氨酸和銅離子含量具有重要意義,進(jìn)而可以預(yù)防青光眼的發(fā)生。相比其它技術(shù),熒光方法具有簡(jiǎn)單、快速、高選擇性及高靈敏性等優(yōu)點(diǎn)而
2、倍受關(guān)注,并日益廣泛地應(yīng)用在生物、環(huán)境和微量化學(xué)檢測(cè)中。將對(duì)生物分子或離子的識(shí)別信息轉(zhuǎn)換為熒光基團(tuán)的光物理性質(zhì)的改變,如熒光增強(qiáng)或減弱、光譜移動(dòng)等變化,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)分子或離子的檢測(cè)。本研究合成了系列石墨烯熒光化合物,發(fā)現(xiàn)將熒光發(fā)色基團(tuán)引入到載體,獲得了水溶性良好、分別對(duì)谷氨酸鈉和銅離子選擇性高的石墨烯熒光化合物。
實(shí)驗(yàn)方法:
一、石墨烯熒光探針的制備
?。ㄒ唬┦晒饣衔颎AF(氧化石墨烯熒光體雜化物)的合
3、成
本實(shí)驗(yàn)中氧化石墨烯采用改進(jìn)的Hummers法制備。取確定質(zhì)量的氧化石墨烯固體,超聲分散于一定體積的水中,得到已知濃度的氧化石墨烯分散液。利用氧化石墨烯和氨基熒光素為反應(yīng)原料,采用一系列化學(xué)手段,使二者之間形成穩(wěn)定的酰胺鍵,從而得到功能化的氧化石墨烯,即熒光探針GAF。
?。ǘ┦晒饣衔颎AP(氧化石墨烯萘基雜化物)的合成
取一定體積已知濃度的氧化石墨烯分散液,利用催化劑使羧基得以活化,加入一定量萘
4、胺的醇溶液,加熱,脫水縮合,生成了對(duì)銅離子具有高度選擇性的熒光探針GAP。
二、石墨烯熒光探針的表征
對(duì)石墨烯熒光化合物GAF和GAP的表征手段包括:利用傅立葉紅外光譜和X-射線光電子能譜實(shí)現(xiàn)了對(duì)化合物成分分析,利用透射電鏡、X-射線衍射儀、拉曼光譜實(shí)現(xiàn)了對(duì)物質(zhì)形貌和微結(jié)構(gòu)的分析,利用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)和熒光分光光度計(jì)實(shí)現(xiàn)了對(duì)電子躍遷的觀察。利用核磁實(shí)現(xiàn)了對(duì)有機(jī)物結(jié)構(gòu)的分析。熱重分析揭示了物質(zhì)熱穩(wěn)定性的情況。原子力顯
5、微鏡實(shí)現(xiàn)了對(duì)固體材料表面結(jié)構(gòu)的分析。
三、石墨烯熒光探針選擇性及靈敏度的檢測(cè)
?。ㄒ唬┦晒馓结楪AF的選擇性
取一定質(zhì)量制備成功的石墨烯熒光探針GAF,溶于醇水混合溶劑中,反復(fù)超聲后,靜置,得均勻分散液。檢測(cè)多種氨基酸和糖類,通過(guò)對(duì)熒光探針GAF熒光強(qiáng)度的觀察,實(shí)現(xiàn)了對(duì)谷氨酸鈉的高度選擇性,具有高的靈敏度,可以檢測(cè)出低至0.5mg/L的濃度。
?。ǘ┦晒馓结楪AP的選擇性
取一
6、定質(zhì)量制備成功的石墨烯熒光探針GAP,溶于醇水混合溶劑中,反復(fù)超聲后,靜置,得均勻分散液。檢測(cè)多種具有生理功能的陽(yáng)離子,通過(guò)對(duì)熒光探針GAP熒光強(qiáng)度的觀察,實(shí)現(xiàn)了對(duì)銅離子的高度選擇性,具有高的靈敏度,可以檢測(cè)出低至1 mg/L的濃度。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
?。ㄒ唬┦晒馓结楪AF體系中,通過(guò)比較原料和目標(biāo)產(chǎn)物的紅外、紫外光譜及熱穩(wěn)定性變化證實(shí)產(chǎn)物的成功制備。通過(guò)熒光分光光度計(jì)檢測(cè)了熒光探針GAF對(duì)各種氨基酸和糖類的響應(yīng)情況
7、,實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示對(duì)谷氨酸鈉具有高度的選擇性,且在不同濃度的谷氨酸鈉溶液中熒光強(qiáng)度不同。
?。ǘ┦晒馓结楪AP體系中,我們對(duì)目標(biāo)產(chǎn)物進(jìn)行了紅外、紫外可見(jiàn)光譜、拉曼光譜、X-射線光電子能譜等表征證實(shí)了產(chǎn)物的成功制備。通過(guò)熒光分光光度計(jì)檢測(cè)了熒光探針GAP對(duì)生命體中的金屬離子的響應(yīng)情況,實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示對(duì)銅離子具有高度的選擇性,隨著銅離子濃度的增強(qiáng),熒光探針GAP的熒光不斷下降。
實(shí)驗(yàn)結(jié)論:
本研究首次發(fā)明并成功
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