ACEI，ARB單用或聯(lián)用對(duì)心肌梗死大鼠心肌細(xì)胞凋亡及心臟ACE2表達(dá)的影響.pdf

1、研究背景和意義：心肌梗死導(dǎo)致心肌細(xì)胞丟失，非梗死區(qū)心肌細(xì)胞肥大，間質(zhì)纖維化，這種重構(gòu)最終引起心功能下降。心肌細(xì)胞凋亡參與心臟重構(gòu)，是造成心肌梗死后心肌細(xì)胞持續(xù)丟失的重要原因。血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑(Angiotensin-Converting I enzyme inhibitorACEI)和血管緊張素II受體1拮抗劑(angiotensin II type 1 receptorblockers ARB)均具有抑制心肌細(xì)胞凋亡，改善心室重

2、塑的作用，但是關(guān)于ARB對(duì)心肌梗死的影響以及ACEI和ARB聯(lián)用是否比單用更優(yōu)還有爭(zhēng)議。另外部分患者在應(yīng)用RAS阻斷劑的基礎(chǔ)上仍然發(fā)生心肌梗死，對(duì)這部分患者是否仍然會(huì)因使用RAS阻斷劑而受益在臨床上很難判斷。血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2(Angiotensin-Conveaing enzyme 2 ACE2)是新發(fā)現(xiàn)的血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(Angiotensin-Converting enzyme ACE)同系物，與RAS系統(tǒng)可相互影響，對(duì)心功能具有

3、保護(hù)作用，但關(guān)于心肌梗死后 ACE2變化及RAS阻斷劑對(duì)其影響的研究還較少，關(guān)于ACE2表達(dá)與心肌細(xì)胞凋亡的關(guān)系目前還沒有研究報(bào)道。故本課題以心肌梗死大鼠為模型，觀察心肌梗死后心肌細(xì)胞凋亡情況，評(píng)價(jià)ACEI，ARB單用或聯(lián)用預(yù)處理對(duì)心肌細(xì)胞凋亡的影響及其與ACE2的關(guān)系。 方法：90只SD大鼠隨機(jī)分為5組，每組18只：(1)假手術(shù)組；(2)心肌梗死組(手術(shù)+生理鹽水)；(3)替米沙坦組(手術(shù)+替米沙坦1mg/kg.d)；(4)福

4、辛普利組(手術(shù)+福辛普利10mg/kg.d)；(5)聯(lián)合用藥組(手術(shù)+替米沙坦1mg/kg.d+福辛普利10mg/kg.d)：分為心肌梗死后24小時(shí)和14天兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)，每組每個(gè)時(shí)間點(diǎn)9只。管飼給藥2周后除假手術(shù)組外，其余大鼠結(jié)扎冠狀動(dòng)脈前降支建立心肌梗死模型，建模后繼續(xù)給藥至各時(shí)間點(diǎn)。在規(guī)定時(shí)間點(diǎn)有創(chuàng)測(cè)血壓后采集標(biāo)本。左室取出后計(jì)算左室質(zhì)量指數(shù)(left ventricular mass index LVMI)；UNEL，法檢測(cè)心肌細(xì)胞

5、凋亡；免疫組化學(xué)法(immunohistochemistry IHC)檢測(cè)血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2(angiotensin-convertion enzym 2 ACE2)蛋白的表達(dá)：逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶聯(lián)反應(yīng)(Reverse Translation-Pclymerase Chain Reaction RT-PCR 法檢測(cè)ACE2mRNA的表達(dá)變化。 結(jié)果：(1)心肌梗死后24小時(shí)及14天，替米沙坦組和福辛普利組血壓與梗死對(duì)照組沒有差別，聯(lián)

6、合用藥組血壓低于單獨(dú)用藥組。(2)心肌梗死后14天，梗死組大鼠LVMI顯著增加，替米沙坦與福辛普利顯著降低LVMI。(3)心肌梗死后24小時(shí)，梗死區(qū)，梗死周邊區(qū)心肌細(xì)胞凋亡顯著增加(1.42％；2.37％)，遠(yuǎn)離梗死區(qū)心肌細(xì)胞凋亡未見顯著增加(0.25％)。(4)心肌梗死后14天，梗死區(qū)心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)已與假手術(shù)組沒有差別，梗死周邊區(qū)心肌細(xì)胞凋亡上升(3.01％)，遠(yuǎn)離梗死區(qū)亦見到細(xì)胞凋亡顯著增加(0.74％)。(5)替米沙坦與福辛普利

7、干預(yù)組在心梗后24小時(shí)，梗死區(qū)和梗死周邊區(qū)心肌細(xì)胞凋亡率低于梗死對(duì)照組，但沒有達(dá)到顯著性。(6)替米沙坦干預(yù)組在心梗后14天，梗死周邊區(qū)及遠(yuǎn)離梗死區(qū)心肌細(xì)胞凋亡顯著下降(2.20％vs 3.09％p＜0.05；0.38％vs 0.74％p＜0.05)，在福辛普利組亦得到相同結(jié)果(2.25％vs 3.09％p＜0.05；0.40％vs 0.74％p＜0.05)聯(lián)合用藥與單獨(dú)用藥相比沒有進(jìn)一步降低凋亡率(2.20％；0.42％)。(7)心肌

8、梗死后14天，心肌梗死組ACE2蛋白表達(dá)顯著高于假手術(shù)組(p＜0.05)，替米沙坦，福辛普利及聯(lián)用藥組表達(dá)進(jìn)一步增加(p＜0.05)，其中替米沙坦組ACE2蛋白表達(dá)顯著高于另兩個(gè)用藥組(p＜0.05)。(8)心肌梗死后14天心肌梗死組ACE2mRNA未見明顯增加，替米沙坦組ACE2mRNA表達(dá)顯著增加(p＜0.05)，福辛普利和聯(lián)用藥組ACE2mRNA表達(dá)亦增加，但差異沒有顯著性。(9)心肌梗死后14天，直線相關(guān)性分析顯示在梗死周邊區(qū)和

9、遠(yuǎn)離梗死區(qū)心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)與ACE2蛋白表達(dá)顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.576，p＜0.01；r=-0.491，p＜0.01)。 結(jié)論：(1)心肌梗死后心臟持續(xù)存在心肌細(xì)胞凋亡。(2)替米沙坦，福辛普利及二者聯(lián)用預(yù)處理均能抑制心肌梗死后心肌細(xì)胞凋亡，替米沙坦與福辛普利效果相當(dāng)，而聯(lián)用不比單用更能抑制心肌細(xì)胞凋亡。(3)替米沙坦，福辛普利及二者聯(lián)用均能增加心肌梗死后ACE2的表達(dá)，替米沙坦較福辛普利和聯(lián)合用藥更能增加ACE2的表達(dá)。(4