基于魚鰾膜的葡萄糖氧化酶生物傳感器的研究.pdf

1、酶的固定化方法很多，主要有吸附法、包埋法、共價(jià)鍵合法和交聯(lián)法等；用于固定化酶的載體材料也很多，如凝膠、無機(jī)材料、有機(jī)聚合物以及生物材料等。本文初步探究了酶的固定化載體材料的選擇及酶的固定化方法，通過對一系列生物載體材料的比較，首次采用天然生物材料魚鰾作為酶的固定化載體。魚鰾的生物結(jié)構(gòu)為葡萄糖氧化酶提供了很好的微生物環(huán)境，非常有利于酶的固定化。 以戊二醛為交聯(lián)劑，采用共價(jià)交聯(lián)的方法將葡萄糖氧化酶固定在魚鰾膜上，然后將此酶膜附著在具

2、有熒光猝滅效應(yīng)的氧敏感光極膜上，置于自制的流通池內(nèi)，制成檢測葡萄糖的光學(xué)酶生物傳感器。氧敏感膜是由被硅膠吸附的[Ru(dpp)3][(4-Clph)4B]2的凝膠顆粒組成，該聚合物在470nm激發(fā)波長下，可得到波長為605nm的發(fā)射峰，并且在與氧分子作用下，Ru(Ⅱ)的聚合物發(fā)生熒光猝滅效應(yīng)。反應(yīng)中，固定在魚鰾膜上的葡萄糖氧化酶催化葡萄糖與氧分子作用，則在膜上產(chǎn)生消耗氧的動(dòng)力學(xué)平衡，隨著溶解氧的消耗，會(huì)產(chǎn)生熒光強(qiáng)度的增大，而熒光強(qiáng)度的改

3、變是與葡萄糖濃度相關(guān)的，根據(jù)此原理可以對葡萄糖進(jìn)行定量分析。 利用該傳感器測定葡萄糖溶液，測得葡萄糖濃度線性范圍，20℃時(shí)為0.100-0.800mmolL-1；30℃時(shí)為0.010-0.400molL-1。詳細(xì)研究了pH值、緩沖液濃度、溫度等因素對此傳感器的影響，此外，測定了該傳感器的重現(xiàn)性和選擇性，重復(fù)實(shí)驗(yàn)的RSD值為2.1％，并且具有很高的選擇性。在4℃下，此傳感器的使用壽命為10個(gè)月，并成功地利用此傳感器進(jìn)行人體血糖、尿