葵花粕中綠原酸的提取純化及其春抗氧化特性研究.pdf

1、綠原酸(CGA．)具有抗氧化、抑菌、抗突變和消炎作用，對綠原酸相關(guān)產(chǎn)品的開發(fā)己逐漸深入到食品、保健、醫(yī)藥和日用化工等多個領(lǐng)域，應(yīng)用前景廣闊。葵花籽仁含有1．1％～4．5％綠原酸，我國又有豐富的葵粕資源，以葵粕為原料提取綠原酸，不僅使向日葵資源得到綜合開發(fā)利用，而且從葵花粕中去除了綠原酸改善了葵花蛋白粉色澤，而提高了葵花籽及葵花粕的利用價值。
　　 本研究主要從建立一種葵花粕中綠原酸準(zhǔn)確、快速、簡便的測定方法，葵花粕綠原酸提取工藝

2、，大孔吸附樹脂分離純化葵花粕綠原酸，葵花粕綠原酸提取物成分及抗氧化特性研究等這四個方面進行研究。
　　 在比較分析高效液相色譜法(HPLC)和紫外分光光度法(UV)測定CGA的基礎(chǔ)上，通過運用Origin8．O數(shù)據(jù)處理分析軟件，建立了一種快速、有效和準(zhǔn)確的CGA檢測方法。結(jié)果表明：這兩種方法測定CGA的結(jié)果符合方程：
　　 Y=1．386+0．4082X+0．0132X2-8．438X3，R2=0．9856，其中X為Uv

3、測定結(jié)果，Y為HPLC測定結(jié)果，經(jīng)驗證，在5．5-33μg/mL濃度范圍內(nèi)，該方程準(zhǔn)確可靠，從而可以采用UV法快速、準(zhǔn)確地測量大批量樣品中的CGA含量。
　　 綠原酸得率為考察指標(biāo)，在單因素試驗的基礎(chǔ)上，運用DPS6．55數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析軟件，采用二次正交旋轉(zhuǎn)組合試驗設(shè)計方法，建立了乙醇溶液提取葵花粕綠原酸的二次回歸模型，以綠原酸得率為響應(yīng)值經(jīng)響應(yīng)面分析，確立醇提葵花粕綠原酸的優(yōu)化工藝條件為：提取溫度為75℃，提取時間為60min，

4、固液比為1：20(W／V)，乙醇濃度為60％(V／V)，綠原酸的提取得率為2．57％(m／m)。
　　 采用大孔吸附樹脂分離純化綠原酸，通過分析十種樹脂的吸附量和解析率，樹脂NKA-Ⅱ的吸附量和解析率最高，分別可達到60mg/g的吸附量和77．13％的解析率，因此選擇樹脂。NKA—Ⅱ為葵粕綠原酸純化樹脂；其靜態(tài)吸附的最佳工藝參數(shù)為：吸附時間為2h，進液pH為3．6，綠原酸進樣濃度為8．64rag／mL；通過大孔樹脂動態(tài)吸附試驗和

5、解析試驗確定了利用NKA-Ⅱ樹脂動態(tài)純化葵花粕綠原酸的工藝參數(shù)為：洗脫劑為90％乙醇，吸附時間為8h，洗脫液收集時間在65．125min之間。將收集到的洗脫液低溫濃縮后真空冷凍干燥，得到純度為36．2％的綠原酸凍干粉。純化前乙醇粗提物的純度僅為16．6％，經(jīng)過純化后，純度提高了近一倍。綠原酸的回收率達到。79．6％。
　　 在綠原酸抗氧化功能研究中，通過考察不同純度的葵花粕綠原酸乙醇粗提取物(粗提品)、標(biāo)準(zhǔn)品以及vc對DPPH自

6、由基清除率、還原活性、亞鐵離子(Fe2+)鰲合能力、羥自由基(-OH)清除能力指標(biāo)，對葵花粕綠原酸提取物進行了比較全面和系統(tǒng)的抗氧化特性研究。在清除DPPH自由基的試驗中，各樣品在不同的濃度時達到最大的DPPH自由基清除率96．7％，其中純度為36．2％的NKA-Ⅱ樹脂純化制品和Vc在不同濃度對DPPH自由基清除率趨勢都相近，并且都在濃度為25μg／mL，時，DPPH自由基的清除率達9h6．7％；在還原活性試驗中，NKA-II樹脂純化制

7、品和標(biāo)準(zhǔn)品的還原活性接近，在濃度為1251xg／mL．時，分別相當(dāng)于1 77．861μg/mL和190．89μg/mL的L-cysteine，但是超濾制品和粗提品隨著濃度的增大而還原活性并沒有明顯的提高。在亞鐵離子螯合試驗中，NKA．II樹脂純化制品和綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品的螫合率明顯高于參照組vc和EDTA。在羥自由基的清除試驗中，綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品、Vc、NKA-II樹脂純化制品、超濾制品和粗提品的EC50值(EC50：清除50％的·OH時，樣品的