基于層層組裝的白蛋白粒子的結(jié)構(gòu)設(shè)計及功能優(yōu)化.pdf

1、肝癌是我國常見的惡性腫瘤，常用的抗肝癌藥物因缺乏對腫瘤細胞的選擇性有毒性大、副作用多等缺點，因此發(fā)展一種可以實現(xiàn)靶向輸送和智能響應(yīng)的藥物載體十分必要?；诰酆衔锛{米粒子的藥物控制釋放體系，具有亞微米尺度、易于通過多種途徑給藥、保持藥物活性以及緩釋的特點，成為藥物控制釋放領(lǐng)域中的研究熱點。牛血清白蛋白(BSA)，由于來源豐富、生物相容性良好、降解產(chǎn)物無毒等優(yōu)點，成為最常見的載體材料。本文利用去溶劑－化學交聯(lián)法制備了表面帶負電的BSA納米粒

2、子，進一步通過層層自組裝技術(shù)在粒子表面修飾了聚電解質(zhì)多層膜；利用聚電解質(zhì)分子中活性基團，在多層膜表面上引入了具有延長體內(nèi)循環(huán)時間及靶向功能的基團，最后在體外細胞實驗中研究了粒子的控制釋放性能和靶向功效，并且研究了粒子的血液相容性和初步體內(nèi)分布。
　　 首先，利用去溶劑－化學交聯(lián)法制備BSA納米粒子，在其表面層層組裝了聚烯丙基胺鹽酸鹽(PAH)/聚苯乙烯磺酸鈉(PSS)多層膜，吸附了不同聚乙二醇(PEG)接枝密度的PAH-g-PE

3、G，以觀察具有不同表面PEG密度的粒子的穩(wěn)定性，以及pH值對粒子包埋釋放阿霉素(DOX)的影響，優(yōu)化了粒子包埋DOX的條件。實驗證實對BSA粒子的修飾，在提高粒子的穩(wěn)定性的同時，不影響其藥物包埋和pH響應(yīng)釋放性能。表面PEG密度越高，粒子穩(wěn)定性越好。
　　 其次，在BSA@(PAH/PSS)2粒子的表面吸附了PAH-g-PEG-COOH，通過碳二亞胺(EDC)/N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)偶聯(lián)了靶向分子適配子AS1411，從而得

4、到了接枝靶向分子的BSA納米粒子(BSA@(PAH/PSS)2/PAH-g-PEG-CONH--Apt，BNPs-Apt)。細胞培養(yǎng)表明了BNPs-Apt對人肝癌細胞(QGY-7703)的胞吞量明顯高于肝正常細胞(Hepli)，可見BNPs能夠有效區(qū)別人肝癌細胞和肝正常細胞；與注射用鹽酸阿霉素(DOX)以及未接枝AS1411的載藥粒子(BNPs/DOX)相比，載藥后的粒子(BNPs-Apt/DOX)對人肝癌細胞毒性增強，但對肝正常細胞的

5、影響保持不變。
　　 最后，為提高粒子的生物相容性，引入更多活性基團，將PAH/PSS多層膜更替為生物功能化的聚賴氨酸(PLL)/肝素(Hep)多層膜，以此修飾BSA納米粒子，表面吸附不同接枝密度的PLL-g-PEG，研究了粒子的穩(wěn)定性發(fā)現(xiàn)在所研究范圍內(nèi)，不同介質(zhì)密度的PLL-g-PEG對粒子的穩(wěn)定性無明顯影響?？疾椴煌砻娴募{米粒子的血液相容性，PLL/Hep多層膜以及PLL-g-PEG修飾的BSA納米粒子抗蛋白粘附能力有所提