1，6-二磷酸果糖離子色譜檢測(cè)及啤酒廢酵母轉(zhuǎn)化制備工藝優(yōu)化.pdf

1、本研究利用DX-600型離子色譜儀，對(duì)1,6-二磷酸果糖的離子色譜檢測(cè)進(jìn)行了研究；利用建立的離子色譜檢測(cè)法對(duì)啤酒酵母細(xì)胞提取液中1，6-二磷酸果糖含量進(jìn)行了測(cè)定；并對(duì)啤酒廢酵母細(xì)胞的干制條件及甜菜糖蜜為碳源制備1，6-二磷酸果糖的工藝進(jìn)行了研究，結(jié)果如下：
　　 1、建立了離子色譜快速、準(zhǔn)確檢測(cè)發(fā)酵液中1,6-二磷酸果糖的新方法。采用AS11-HC陰離子色譜柱，抑制電導(dǎo)檢測(cè)，50 mmol/L KOH淋洗，5min即完成發(fā)酵液中

2、FDP的定性、定量分析。該方法對(duì)1,6-二磷酸果糖的最低檢測(cè)限為0.032 μmol/L（S/N＝3），且在 3.3～211.5μmol/L濃度范圍內(nèi)具有良好線性關(guān)系（r=0.9999，p＜0.0001），回收率為99.0％～100.3％，精密度≤0.04％ (n=5)。該方法還可同時(shí)對(duì)發(fā)酵液中的PO43-、6-磷酸果糖和6-磷酸葡萄糖進(jìn)行定性分析，該方法檢測(cè)FDP與酶法無顯著性差異。
　　 2、分別用酸法、堿法、濃鹽法、微波法

3、、自溶法、微珠渦流法、超聲破碎法及超微粉碎法對(duì)啤酒廢酵母進(jìn)行破壁處理，然后利用建立的離子色譜法測(cè)定各處理方法的細(xì)胞抽提液中FDP的含量，只有微波法、微珠渦流法和超微粉碎法的細(xì)胞抽提液中含有較多的FDP，濃度分別為0.0021、0.0065和0.0048 mmol/L,同時(shí)經(jīng)上述三種方法處理的酵母細(xì)胞也具有較高的通透性，次甲基藍(lán)染色率分別達(dá)到56.3％、95％和100％；利用上述三種方法的細(xì)胞抽提液制備FDP鈣鹽，制得的鈣鹽沉淀中未檢測(cè)到

4、FDP，說明用直接提取法制備FDP產(chǎn)品無實(shí)際經(jīng)濟(jì)效益。
　　 3、分別用滾筒、鼓風(fēng)、真空冷凍、室溫真空干燥法制備干酵母，并對(duì)4種干酵母的通透性和1，6-二磷酸果糖積累能力作出評(píng)價(jià)，其中冷凍干燥的菌體的次甲基藍(lán)染色率達(dá)到90.2％，無機(jī)磷消耗率最高，達(dá)到99.8％，故最終選定真空冷凍干燥法作為制備高活性干酵母的干燥方法。隨后又對(duì)新鮮啤酒廢酵母液的離心條件和厚度為1cm的濕菌體的冷凍干燥時(shí)間做了優(yōu)化，最終確定離心條件為4℃，6000