石蒜不定根培養(yǎng)體系的建立及石蒜生物堿成分的研究.pdf

1、石蒜（Lycoris radiata Herb.）是石蒜科(Amaryllidaceae)石蒜屬(Lycoris Herb.)多年生草本植物，在我國分布普遍。石蒜兼具觀賞價(jià)值和極高的藥用價(jià)值。石蒜中主要藥用成分為生物堿。生物堿藥理作用巨大，它們用于多種疾病的治療，如鎮(zhèn)痛藥，抗高血壓，抗菌，抗癌，解痙藥，鎮(zhèn)咳藥，祛痰，興奮劑的特性，等等。
　　本研究以石蒜鱗莖為材料誘導(dǎo)不定根并建立石蒜不定根的培養(yǎng)體系，并對不定根進(jìn)行切片觀察；植物解

2、剖學(xué)和組織化學(xué)定位及熒光顯微鏡的綜合利用，來探究野生和組培石蒜營養(yǎng)器官的顯微結(jié)構(gòu)及生物堿分布規(guī)律；利用雙向薄層色譜法分離制備生物堿單品，并利用IR鑒定生物堿結(jié)構(gòu)。主要研究結(jié)果如下：
　　1.石蒜不定根培養(yǎng)體系的建立。研究了接種量，肌醇含量，鹽強(qiáng)度及碳源、氮源對石蒜不定根的生長及生物堿累積的影響。結(jié)果表明，石蒜不定根培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基成分為：0.5 mg·L-1NAA+1mg·L-1IBA，接種量為6％（W/V），肌醇含量為300 m

3、g·L-1,鹽強(qiáng)度為1/2MS，石蒜不定根培養(yǎng)的最適碳源為蔗糖，且蔗糖濃度為40 g·L-1，總氮含量為30 mmol·L-1, NH4+/NO3-為1∶4。
　　2.組培和野生石蒜營養(yǎng)器官結(jié)構(gòu)的觀察與比較。成熟的野生根的維管柱一般為六或七原型，而組培根的維管組織形狀不規(guī)則，木質(zhì)部輻射角數(shù)目不定。成熟鱗葉遠(yuǎn)軸面薄壁細(xì)胞形狀較規(guī)則，排列較為整齊；組培鱗葉分化尚不完全，維管組織呈帶狀排列，且形狀不規(guī)則。
　　3.生物堿定位。在野

4、生和組培石蒜根中，生物堿在表皮、皮層、維管柱中均有分布；鱗葉中主要集中于表皮、遠(yuǎn)軸面薄壁細(xì)胞和維管束；在葉中，生物堿分布于葉肉細(xì)胞和維管束，在葉肉中生物堿的分布與葉綠素的分布規(guī)律相似。生物堿主要分布于石蒜根、鱗葉、葉片葉肉細(xì)胞的維管束，尤其是這些細(xì)胞的細(xì)胞壁內(nèi)。
　　4.生物堿單體制備及結(jié)構(gòu)鑒定。乙酸乙酯∶甲醇∶氨水=9∶11∶0.65是雙向薄層色譜第一向的最佳流動(dòng)相，第二向最優(yōu)流動(dòng)相為三氯甲烷∶甲醇∶氨水=18∶2∶0.5。雙向