大蒜油對(duì)大鼠非酒精性脂肪性肝病影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：本研究用高脂飲食誘發(fā)建立大鼠非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD)模型，以大蒜油(garlic oil，GO)進(jìn)行干預(yù)治療。 1．觀察大蒜油對(duì)“NAFLD”的作用效應(yīng)； 2．探討大蒜油可能的作用機(jī)制； 3．比較大蒜油、大蒜素以及陽(yáng)性藥物辛伐他汀對(duì)于“NAFLD”的作用效果。 本研究將有助于進(jìn)一步認(rèn)識(shí)NAFLD的發(fā)病機(jī)理和指導(dǎo)臨床治療。

2、 方法: 1．動(dòng)物分組與處理成年雄性wister大鼠80只，體重(180±20)g，隨機(jī)分為7組：空白組、模型組、大蒜油低劑量組(low dose of garlic oil，GL)、中劑量(mid dose of garlic oil，GM)、高劑量組(high dose of garlic oil，GH)、大蒜素組、辛伐他汀組。除空白組外，各組大鼠于試驗(yàn)第1天一次性腹腔注射(intraperitoneal injectio

3、n，ip)40％(體積分?jǐn)?shù))的四氯化碳3ml/kg.bw，大蒜油各組(低40mg/kg.bw、中80mg/kg.bw、高120mg/kg.bw)經(jīng)口給予大蒜油0.5ml/100g.bw，空白組、模型組、大蒜素組和辛伐他汀組分別給予等體積蒸餾水、玉米油、大蒜素(45mg/kg.bw)和辛伐他汀(4mg/kg.bw)，每天一次?？瞻捉M大鼠飼以基礎(chǔ)飼料，其他組飼以高脂飼料(脂肪20％、膽固醇1％、脫氧膽酸鈉0.2％、丙硫氧嘧啶0.2％、基礎(chǔ)飼

4、料78.6％)，連續(xù)8周。 2．試驗(yàn)指標(biāo)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，稱體重，取大鼠血漿，3000rpm離心20分鐘后取上清，測(cè)定38其中葡萄糖(glucose，GLU)、總膽固醇(cholesterol total，TC)、甘油三酯(triglycerides，TG)、谷氨酸氨基轉(zhuǎn)氨酶(alanine aminotransferase，ALT)、天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)氨酶(aspartate aminotransferase，AST)、高密度脂

5、蛋白膽固醇(high density lipoprotein cholesterol，HDL-C)、低密度脂蛋白膽固(low density lipoprotein cholesterol，LDL-C)、丙二醛(malondiaidehyde，MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)、谷胱甘肽(glutathion，GSH)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(glutathione peroxidase，GSH-P

6、x)、總抗氧化能力(total anti-oxidative capacity,T-AOC)和游離脂肪酸(free fatacid，F(xiàn)FA)；取肝臟，稱重量，計(jì)算肝/體比，即肝指數(shù)，制作肝臟勻漿，測(cè)定其中TC、TG、MDA、SOD、GSH、GSH．PX、T-AOC和FFA，觀察組織病理學(xué)變化。 結(jié)果: 1．一般表現(xiàn): 空白組大鼠狀態(tài)良好，皮毛有光澤；其他組大鼠均較空白組體重明顯減輕，皮毛光澤度差；模型組肝體比較空

7、白組升高96.30％(P<0.01)，大蒜油高、中、低劑量組、大蒜素組和辛伐他汀組較模型組分別降低了16.98％(P<0.01)、11.32％(P<0.05)、3.78％、9.43％(P<0.05)、和18.87％(P<0.01)。 2．血清測(cè)定結(jié)果: 1)GLU的變化：模型組較空白組上升34.60％(P<0.01)，大蒜油高、中、低劑量組、大蒜素組和辛伐他汀組較模型組分別降低了16.30％、15.99％(P<0.01)

8、、10.03％(P<0.05)、18.03％和17.40％(P<0.01)。 2)ALT的變化：模型組較空白組上升107.18％(P<0.01)，大蒜油高、中、低劑量組、大蒜素組和辛伐他汀組較模型組分別降低了33.15％、32.28％、24.69％、22.52％和23.97％(P<0.01)。 3)TC的變化：模型組較空白組上升84.28％(P<0.01)，大蒜油高、中、低劑量組、大蒜素組和辛伐他汀組較模型組分別降低了1

9、9.45％(P<0.01)、8.19％、4.78％、3.07％、18.09％(P<0.05)。 4)TG的變化：模型組較空白組上升233.33％(P<0.01)，大蒜油高、中、低劑量組、大蒜素組和辛伐他汀組較模型組分別降低了33.85％、59.51％、36.15％、58.46％、50％(P<0.01)。 5)LDL-C的變化：模型組較空白組上升57.73％(P<0.01)，大蒜油高、中劑量組和辛伐他汀組較模型組分別降低了

10、16.34％(P<0.01)、13.07％(P<0.05)、16.34％(P<0.01)，大蒜油低劑量組和大蒜素組較模型組稍有上升。 6)SOD的變化：模型組較空白組下降44.94％(P<0.01)，大蒜油高、中、低劑量組、大蒜素組和辛伐他汀組較模型組分別升高了58.30％、37.98％(P<0.01)、26.09％(P<0.05)、68.79％、70.20％(P<0.01)。 7)MDA的變化：模型組較空白組升高77.

11、74％(P<0.01)，大蒜油高、中、低劑量組、大蒜素組和辛伐他汀組較模型組分別降低了26.90％、22.90％(P<0.01)、19.31％(P<0.05)、27.93％、34.09％(P<0.01)。 8)FFA的變化：模型組較空白組升高102.02％(P<0.01)，大蒜油高、中、低劑量組、大蒜素組和辛伐他汀組較模型組分別降低了38.78％、37.76％、25.20％、38.12％、28.30％(P<0.01)。

12、9)GSH的變化：模型組較空白組降低31.18％(P<0.01)，大蒜油高、中、低劑量組、大蒜素組和辛伐他汀組較模型組分別升高了18.92％、17.11％(P<0.05)、10.12％、21.93％(P<0.01)、17.83％(P<0.05)。 10)T-AOC的變化：模型組較空白組降低47.81％(P<0.01)，大蒜油高、中、低劑量組、大蒜素組和辛伐他汀組較模型組分別升高了49.53％(P<0.05)、48.10％(P<0

13、.01)、43.98％(P<0.01)、30.70％(P<0.01)、18.67％。 11)各組AST、HDL-C無(wú)明顯差異；模型組GSH-PX較空白組降低29.55％(P<0.01)，其他組與模型組均無(wú)顯著差異。 3．肝勻漿測(cè)定結(jié)果: 1)TC的變化：模型組較空白組上升347.22％(P<0.01)，大蒜油高、中、低劑量組、大蒜素組和辛伐他汀組較模型組分別降低了40.99％、34.78％、32.91％、78.8

14、9％、39.13％(P<0.01)。 2)TG的變化：模型組較空白組上升211.43％(P<0.01)，大蒜油高、中、低劑量組、大蒜素組和辛伐他汀組較模型組分別降低了39.00％、36.75％、24.51％、42.03％、47.48％(P<0.01)。 3)SOD的變化：模型組較空白組下降31.52％(P<0.01)，大蒜油高、中、低劑量組、大蒜素組和辛伐他汀組較模型組分別升高了36.90％、29.98％、28.79％、

15、41.39％、34.01％(P<0.01)。 4)MDA的變化：模型組較空白組升高189.21％(P<0.01)，大蒜油高、中、低劑量組、大蒜素組和辛伐他汀組較模型組分別降低了27.36％、23.88％(P<0.05)、18.16％、26.37％(P<0.05)、30.85％(P<0.05)。 5)FFA的變化：模型組較空白組升高383.29％(P<0.01)，大蒜油高、中、低劑量組、大蒜素組和辛伐他汀組較模型組分別降低

16、了67.67％、64.48％、54.33％、61.83％、60.18％(P<0.01)。 6)GSH的變化：模型組較空白組降低25.93％(P<0.01)，大蒜油高、中、低劑量組、大蒜素組和辛伐他汀組較模型組分別升高了13.90％(P<0.01)、12．79％(P<0.05)、4.03％、15.03％(P<0.05)、17.45％(p<0.05)。 4．肝臟形態(tài)學(xué)改變: 大鼠肝臟冰凍切片經(jīng)光鏡觀察顯示，空白組大鼠

17、肝細(xì)胞形態(tài)正常，細(xì)胞核居中，未見(jiàn)脂滴，肝索、肝竇結(jié)構(gòu)正常；模型組肝細(xì)胞重度脂肪變，為小泡和大泡性脂肪變，肝細(xì)胞腫脹，肝竇間隙明顯變窄。大蒜油高劑量組、大蒜素組大鼠肝細(xì)胞細(xì)胞核居中，見(jiàn)少量小泡，肝索結(jié)構(gòu)正常，肝竇間隙無(wú)明顯變化。大蒜油中、低劑量組和辛伐他汀組肝細(xì)胞脂肪變程度較模型組減輕，但較高劑量組脂變嚴(yán)重。 結(jié)論: 1．長(zhǎng)期高脂高膽固醇飲食建立的大鼠NAFLD模型存在胰島素抵抗，脂質(zhì)代謝紊亂。 2．大蒜油可改善肝