三種藥用植物的化學(xué)成分及其初步生物活性研究.pdf

1、自上世紀(jì)六十年代起，隨著一些天然植物藥的相繼研發(fā)成功，從天然植物中尋找藥物或藥物先導(dǎo)化合物，成了眾多化學(xué)工作者從事的熱門研究領(lǐng)域之一。我國(guó)植物資源豐富，其中部分植物作為我國(guó)的傳統(tǒng)中藥材，具有悠久的藥用歷史，為人們的健康做出了重要貢獻(xiàn)。然而，對(duì)于其中許多非傳統(tǒng)藥用植物品種，至今我們尚未知其內(nèi)的基礎(chǔ)物質(zhì)成分，為了充分發(fā)掘這些寶貴的植物資源，對(duì)它們的化學(xué)成分及成分的生物活性進(jìn)行研究，為它們的入藥提供科學(xué)依據(jù)，對(duì)于發(fā)揚(yáng)我國(guó)傳統(tǒng)中醫(yī)藥事業(yè)顯得非常

2、有必要和有意義。
　　本論文主要對(duì)三種藥用植物的化學(xué)成分進(jìn)行了研究，其中的兩種植物主要對(duì)其內(nèi)的小分子化合物進(jìn)行了提取分離和鑒定，并對(duì)部分所得化合物的腫瘤細(xì)胞毒活性進(jìn)行了篩選。另一種植物主要對(duì)其內(nèi)的大分子（多糖）成分進(jìn)行了提取分離和鑒定，并對(duì)所得成分的免疫促進(jìn)活性進(jìn)行了測(cè)試。
　　利用現(xiàn)代層析分離技術(shù)，分別對(duì)報(bào)春花科珍珠菜屬植物小葉星宿菜（LysimachiaparvifoliaFrahoh）和忍冬科鬼吹簫屬植物鬼吹簫（Ley

3、cesteriaformosaWall）的乙醇提取物進(jìn)行了分離，分別從該兩種藥用植物中分離得到22個(gè)化合物和22個(gè)化合物（共44個(gè)），通過(guò)化學(xué)分析及質(zhì)譜(MS)、紅外光譜(IR)、氣質(zhì)色譜(GC-MS)、以及1D/2D核磁共振譜等現(xiàn)代分析手段對(duì)它們的結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定，最終，鑒定了其中41個(gè)化合物的結(jié)構(gòu)。其中，有五個(gè)為新化合物，它們均分離自小葉星宿菜，分別鑒定為:13β-28-epoxy-3β,22α，23-trihydroxyolean-1

4、6-one(C30H48O5);13β-28-epoxy-22α,23-dihydroxyolean-3,16-dione(C30H46O5);anagalligenone-3-O-α-L-arabinopyranoside(C35H56O8);anagalligenone-3-O-[β-D--glucopyranosyl(1→4)-α-L-arabinopyranoside](C41H66O13;anagalligenone-3-O-

5、-[β-D-xylopyranosyl((1→)2)-β-D-glucopyranosyl((1→)4)-α-L-arabinopyranoside](C46H74O17)。
　　根據(jù)所得化合物的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，結(jié)合該類化合物活性相關(guān)的文獻(xiàn)報(bào)道，我們選取了其中25個(gè)化合物，利用抗腫瘤藥物體外敏感性活性篩選常用的MTT法，以六種人體常見(jiàn)的腫瘤細(xì)胞株為受試對(duì)象，對(duì)它們的腫瘤細(xì)胞毒活性進(jìn)行了測(cè)試。結(jié)果表明，其中部分化合物對(duì)所測(cè)試的腫瘤細(xì)胞株均

6、表現(xiàn)出很強(qiáng)的細(xì)胞毒活性?；谶@一結(jié)果，我們選取其中活性最強(qiáng)的化合物10，以HepG2細(xì)胞為受試對(duì)象，對(duì)其可能的活性作用機(jī)理進(jìn)行初步探究，通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)對(duì)細(xì)胞的凋亡情況進(jìn)行檢測(cè)，再經(jīng)PI和DAPI分別對(duì)樣品處理前后的受試細(xì)胞進(jìn)行染色，并在熒光顯微鏡下對(duì)細(xì)胞的型態(tài)變化進(jìn)行觀察。結(jié)果表明，化合物的細(xì)胞毒活性來(lái)源于其可破壞細(xì)胞骨架，使細(xì)胞膜破裂，導(dǎo)致細(xì)胞質(zhì)外流而壞死，而非通過(guò)引起細(xì)胞程序性死亡（凋亡）來(lái)實(shí)現(xiàn)。
　　利用熱水提取醇沉的方法對(duì)

7、佛手（CitrusmedicaL.var.sarcodactylisSwingle）中的多糖類成分進(jìn)行提取，再通過(guò)DEAESepharoseFastFlow陰離子交換柱色譜和SephadexG系列凝膠柱色譜先后對(duì)其進(jìn)行分離與純化，最終，得到四個(gè)均一的多糖組分FCp-1、FCp-2、FCp-3和FCp-4;再經(jīng)高效凝膠體積排阻色譜(HPGPC)對(duì)它們的純度及分子量分布范圍進(jìn)行測(cè)試后，通過(guò)紅外光譜(IR)、紫外光譜(UV)、氣質(zhì)色譜(GC-

8、MS)及1D/2D核磁共振譜，結(jié)合酸水解、甲基化、乙?；然瘜W(xué)分析法對(duì)它們的結(jié)構(gòu)進(jìn)行確定。結(jié)果表明，F(xiàn)Cp-1為一雜多糖，含有阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、鼠李糖和木糖，它們的摩爾比為3.0∶7.0∶4.1∶1.0∶1.5;FCp-2和FCp-4為具有→4)-α-D-GalpA(1→鏈接的半乳糖醛酸聚糖;而FCp-3則為具有→6)-α-D-Glcp（1→鏈接的葡聚糖?；诙嗵瞧毡榫哂忻庖叽龠M(jìn)活性，我們以大鼠離體脾細(xì)胞和胸腺細(xì)胞為受試對(duì)象，對(duì)