人類腦膠質(zhì)瘤MGMT基因啟動子區(qū)甲基化作用研究.pdf

1、目的：研究人類腦膠質(zhì)瘤MGMT（O6-甲基鳥嘌呤-DNA-甲基轉移酶）基因啟動子區(qū)甲基化與該基因表達及腦膠質(zhì)瘤細胞對化療藥物敏感性三者之間的關系。 方法：取人腦膠質(zhì)瘤u251細胞系，實驗分5-aza-2'-deoxycytidine（5azadC）未處理組和處理組，行細胞的培養(yǎng)、傳代，分別提取未處理組細胞和處理組細胞的RNA、行RT-PCR對比驗證MGMT基因的表達量的變化并以MSP（甲基化特異性的PCR）方法檢測未處理組MGM

2、T基因啟動子區(qū)甲基化程度。按5azadC處理前后兩組細胞分別聯(lián)合應用順鉑或替莫唑胺，以流式細胞儀檢測各組細胞凋亡情況。 結果：MSP驗證了人腦膠質(zhì)瘤u251細胞MGMT基因存在啟動子區(qū)的部分甲基化的現(xiàn)象。5azadC去甲基化處理組較未處理組MGMT基因表達量得到了明顯的恢復。體外藥敏試驗中發(fā)現(xiàn)5azadC與替莫唑胺聯(lián)合使用（MGMT基因的表達上調(diào)）使得人腦u251膠質(zhì)瘤細胞對替莫唑胺脫敏，而5azadC與順鉑的聯(lián)合表現(xiàn)為對u25