人類(lèi)腦膠質(zhì)瘤MGMT基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化作用研究.pdf

1、目的：研究人類(lèi)腦膠質(zhì)瘤MGMT（O6-甲基鳥(niǎo)嘌呤-DNA-甲基轉(zhuǎn)移酶）基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化與該基因表達(dá)及腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物敏感性三者之間的關(guān)系。 方法：取人腦膠質(zhì)瘤u251細(xì)胞系，實(shí)驗(yàn)分5-aza-2'-deoxycytidine（5azadC）未處理組和處理組，行細(xì)胞的培養(yǎng)、傳代，分別提取未處理組細(xì)胞和處理組細(xì)胞的RNA、行RT-PCR對(duì)比驗(yàn)證MGMT基因的表達(dá)量的變化并以MSP（甲基化特異性的PCR）方法檢測(cè)未處理組MGM

2、T基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化程度。按5azadC處理前后兩組細(xì)胞分別聯(lián)合應(yīng)用順鉑或替莫唑胺，以流式細(xì)胞儀檢測(cè)各組細(xì)胞凋亡情況。 結(jié)果：MSP驗(yàn)證了人腦膠質(zhì)瘤u251細(xì)胞MGMT基因存在啟動(dòng)子區(qū)的部分甲基化的現(xiàn)象。5azadC去甲基化處理組較未處理組MGMT基因表達(dá)量得到了明顯的恢復(fù)。體外藥敏試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)5azadC與替莫唑胺聯(lián)合使用（MGMT基因的表達(dá)上調(diào)）使得人腦u251膠質(zhì)瘤細(xì)胞對(duì)替莫唑胺脫敏，而5azadC與順鉑的聯(lián)合表現(xiàn)為對(duì)u25