Galectin-3、MMP-2及MUC-1蛋白在大腸癌中的表達及臨床意義.pdf

1、目的：大腸癌是一種常見的消化道惡性腫瘤，是危害人類健康的主要惡性腫瘤之一。在西方發(fā)達國家，其發(fā)病率居惡性腫瘤的第二位。在我國，隨著人民生活水平的提高和飲食習慣的改變，大腸癌的發(fā)病率有逐年上升的趨勢。盡管治療手段有了很大的進步，但五年生存率仍然很低。腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移是患者死亡的主要原因之一，因此，研究大腸癌轉(zhuǎn)移的相關因素，對于揭示腫瘤轉(zhuǎn)移的本質(zhì)具有十分重要的科學意義。 腫瘤轉(zhuǎn)移是一個多步驟、多階段的復雜過程，包括細胞脫落、遷徙、粘

2、附、血管生成和逃逸機體免疫反應等。研究表明有多種蛋白參與腫瘤轉(zhuǎn)移的各個過程，并對其有一定的調(diào)控和促進作用。Galectins(β-半乳糖苷結(jié)合蛋白)是生物體內(nèi)廣泛存在的一大類糖結(jié)合蛋白，屬于凝集素家族。Galectins不僅存在于細胞質(zhì)，也存在于細胞核內(nèi)，具有多種生物功能。迄今，人們己經(jīng)在生物體內(nèi)發(fā)現(xiàn)了14個Galectins家族成員，其中Galectin-3廣泛表達于上皮細胞和免疫細胞，參與多種生物學過程，如細胞生長、粘附、分化、血管

3、生成和凋亡等。研究顯示，Galectin-3與腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移的某些過程相關，如血管生成、細胞基質(zhì)相互作用、腫瘤細胞沿血道播散及逸出。因此，檢測Galectin-3水平可能對了解一些腫瘤的轉(zhuǎn)移及預后判斷具有一定的價值?；|(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)是基質(zhì)金屬蛋白酶家族成員之一，能夠降解細胞外基質(zhì)(ECM)和基底膜(BM)，促進腫瘤細胞向周圍組織擴散，從而對腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移產(chǎn)生影響。MUC-1作為一種粘蛋白能加強腫瘤細胞與基底膜蛋白，如層

4、粘連蛋白、纖維連接素和Ⅳ型膠原的粘附力，促進腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移。本研究采用免疫組織化學法，檢測Galeetin-3、MMP-2及MUC-1在大腸正常黏膜、癌旁組織、大腸癌組織中的表達情況，研究Galectin-3、MMP-2及MUC-1的表達與大腸癌的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移及其臨床病理分期的關系，初步探討它們在大腸癌發(fā)病和轉(zhuǎn)移中的作用及它們之間的相關性，希望為闡明大腸癌轉(zhuǎn)移的機制提供研究資料，為大腸癌的臨床治療以及判斷預后提供有價值的參考指標。

5、 方法：本實驗采用白求恩國際和平醫(yī)院及河北醫(yī)科大學第四附屬醫(yī)院2007年3月至5月間住院行外科手術治療的大腸癌手術標本54例。其中男性16例，女性38例。年齡從45～72歲，平均年齡57歲。其中低分化26例，中高分化28例。Dukes分期中AB期29例，CD期25例。同時隨機選取大腸癌旁組織12例，正常組織15例作為對照，癌旁組織在癌組織周圍5cm以內(nèi)進行取材，正常組織取材于病理證實無異常的組織塊。所有患者術前均未接受化學藥物治

6、療或放射線治療。所有標本經(jīng)10％中性福爾馬林液中固定，常規(guī)石蠟包埋、4μm超薄切片，行免疫組化二步法染色，分別檢測大腸癌組織、癌旁組織及正常組織中Galectin-3、MMP-2及MUC-1表達情況。結(jié)合臨床資料對測定數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析，通過SPSS10.0統(tǒng)計軟件進行四格表確切概率法、卡方檢驗、校正卡方檢驗、Spearman等級相關分析等統(tǒng)計學方法，以α=0.05為標準，P<0.05有統(tǒng)計學意義。 結(jié)果： 1.Gale

7、ctin-3在大腸癌組織中陽性表達率為81.48％(44/54)，癌旁組織Galectin-3陽性表達率為41.67％(5/12)，正常組織中Galectin-3陽性表達率為40.00％(6/15)。Galectin-3在大腸癌組織中的表達明顯高于相應的大腸正常黏膜組織及癌旁組織，有統(tǒng)計學意義；在正常組織和癌旁組織中的表達無明顯差異。Galectin-3蛋白在大腸癌組織中的表達與患者年齡、性別、腫瘤大小無相關性；低分化大腸癌的表達比中高

8、分化大腸癌表達明顯增高(X2=5.402)；侵及漿膜大腸癌的表達比未侵及漿膜大腸癌的表達明顯增高(X2=7.364)；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移大腸癌的表達比無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移大腸癌的表達明顯增高(X2=4.835)；DukesCD期大腸癌的表達比DukesAB期大腸癌的表達明顯增高(X2=4.835)。 2.MMP-2在大腸癌組織中的陽性表達率為83.33％(45/54)，癌旁組織MMP-2陽性表達率為50.00％(6/12)，正常組織中MMP-

9、2陽性表達率為40.00％(6/15)。MMP-2在大腸癌組織中的表達明顯高于相應的癌旁正常黏膜組織及癌旁組織，有統(tǒng)計學意義；在正常組織和癌旁組織中的表達無明顯差異。MMP-2蛋白在大腸癌組織中的表達與患者年齡、性別、腫瘤大小無相關性；低分化大腸癌的表達比中高分化大腸癌表達明顯增高(X2=4.287)；侵及漿膜大腸癌的表達比未侵及漿膜大腸癌的表達明顯增高(X2=5.134)；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移大腸癌的表達比無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移大腸癌的表達明顯增高(X

10、2=7.210)；DukesCD期大腸癌的表達比DukesAB期大腸癌的表達明顯增高(X2=7.210)。 3.MUC-1在大腸癌組織中陽性表達率為51.85％(28/54)。在癌旁組織的陽性表達率為16.67％(2/12)，在正常粘膜組織中陽性表達率為13.33％(2/15)。MUC-1在大腸癌組織中的表達明顯高于相應的癌旁正常黏膜組織及癌旁組織，有統(tǒng)計學意義；在正常組織和癌旁組織中的表達無明顯差異。MUC-1蛋白在大腸癌組織

11、中的表達與患者年齡、性別、腫瘤大小無相關性；低分化大腸癌的表達比中高分化大腸癌表達明顯增高(X2=9.048)；侵及漿膜大腸癌的表達比未侵及漿膜大腸癌的表達明顯增高(X2=6.567)；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移大腸癌的表達比無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移大腸癌的表達明顯增高(X2=4.862)；DukesCD期大腸癌的表達比DukesAB期大腸癌的表達明顯增高(X2=4.862)。 4.Galectin-3和MMP-2在大腸癌組織中的表達呈正相關(r=0.2

12、98)；Galectin-3和MUC-1在大腸癌組織中的表達呈正相關(r=0.304)；而MMP-2和MUC-1在大腸癌中的表達無明顯相關關系(r=0.166)。 結(jié)論： 1.Galectin-3在大腸癌組織中的表達量明顯高于正常組織及癌旁組織，并且隨著腫瘤分化程度的降低、侵犯深度的加深、淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移以及Dukes分期的進展而升高，提示Galectin-3在大腸癌的發(fā)生、發(fā)展、侵襲和轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮著重要的作用。

13、2.MMP-2在大腸癌組織中的表達量明顯高于正常組織及癌旁組織，同時隨著腫瘤分化程度的降低、侵犯深度的加深、淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移以及Dukes分期的進展，其表達水平有升高趨勢，提示MMP-2也在大腸癌的發(fā)生、發(fā)展、侵襲和轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮著重要的作用。 3.MUC-1在大腸癌組織中的表達量高于正常組織及癌旁組織，隨著腫瘤分化程度的降低、侵犯深度的加深、淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移以及Dukes分期的進展，其表達水平有升高趨勢，提示MUC-1同樣在大腸癌的發(fā)

14、生、發(fā)展、侵襲和轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮著重要的作用。 4.Galectin-3和MMP-2在大腸癌中的表達呈正相關。Galectin-3是MMP-2的底物，MMP-2的高表達使Galectin-3的表達上調(diào)，兩者共同參與了大腸癌的侵襲和轉(zhuǎn)移。Galectin-3和MUC-1在大腸癌中的表達也呈正相關。MUC-1作為Galectin-3的配體，通過上調(diào)Galectin-3的表達增加腫瘤細胞的粘附力和侵襲力，增大腫瘤的轉(zhuǎn)移潛能。目前的研究結(jié)