喉鱗狀細(xì)胞癌組織2-DE-MS的差異蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf

1、背景：喉癌是頭頸部最常見(jiàn)的惡性腫瘤。雖早期喉癌的預(yù)后較好，五年生存率可達(dá)80％以上，但很多聲門(mén)上及聲門(mén)下型喉癌經(jīng)常在較晚期才被發(fā)現(xiàn)，五年生存率降至70％，如出現(xiàn)頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，則降至50％左右，且多數(shù)病人不能保留喉功能，生活質(zhì)量降低。因此早期發(fā)現(xiàn)和治療是提高此病治愈率的關(guān)鍵。識(shí)別和鑒定喉癌相關(guān)的標(biāo)志蛋白，不僅有助于喉癌的早期診斷，而且有助于闡明喉癌發(fā)生發(fā)展的機(jī)制和進(jìn)一步治療。 目的：應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)尋找與喉癌發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切的的標(biāo)志

2、蛋白，探討該標(biāo)志蛋白在喉癌的發(fā)展機(jī)制中的作用及與喉癌預(yù)后的關(guān)系，以便對(duì)喉癌的早期診斷和進(jìn)一步治療提供一定的依據(jù)。 方法：應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)2-DE和基質(zhì)輔助的激光解吸/離子化飛行時(shí)間質(zhì)譜尋找與喉癌發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切的的標(biāo)志蛋白，比較分析了4例喉癌組織和其正常組織蛋白表達(dá)譜，得到一組差異表達(dá)的蛋白質(zhì)，選取其中之一經(jīng)MALDI-TOF-MS鑒定為IL-12beta2：再通過(guò)RT-PCR和Western blot的方法驗(yàn)證IL-12R be

3、ta 2基因和蛋白在喉癌組織和其配對(duì)的正常組織中的表達(dá)差異。 結(jié)果：1.用2-DE技術(shù)比較分析了喉癌配對(duì)組織(4例)，共發(fā)現(xiàn)了23個(gè)在喉癌和其配對(duì)的正常喉粘膜上皮間差異顯著表達(dá)的蛋白質(zhì)/肽點(diǎn)。經(jīng)數(shù)據(jù)分析和去除全部個(gè)體差異后，經(jīng)MALDI-TOF-MS鑒定分別為：nebulette；adlican；C-myc promotorbinding protein Cell prolifation of antigen Ki-67；Ca

4、sein kinase 1，deltaisoform 2：vimentin：Factor Ⅷ：Zinc finger protein 19；Fatty acid bindingprotein 3；MitochOndrial ribosomal protein L55；Tyrosine kinase；Interleukin12 receptor，beta 2；KIAA1200：KIAA1319；KIAA0216 splice varian

5、t 1:KIAA0216splice variant 2；KIAA0196；KIAA0368；Mitogen-activated protein kinasekinase kinase 3，isoform 1。2.RT-PCR分析：IL-12R beta 2基因在喉癌組織中表達(dá)下調(diào)。3.Western blot分析：IL-12R beta 2蛋白在喉鱗癌組織中下調(diào)。 結(jié)論：2-DE/MS技術(shù)是快速認(rèn)識(shí)喉癌異常表達(dá)蛋白質(zhì)組的有效