超聲造影劑介導(dǎo)PTEN基因影響卵巢癌的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)選用卵巢癌細(xì)胞株進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)，觀察超聲造影劑介導(dǎo)基因治療的可行性，研究超聲照射時(shí)間和超聲造影劑劑量對人野生型PTEN質(zhì)粒導(dǎo)入人卵巢癌細(xì)胞效果的影響，目的是探討一種新型、高效的基因?qū)敕椒癙TEN基囚影響卵巢癌的實(shí)驗(yàn)研究。實(shí)驗(yàn)分為三部分：論文一探討了超聲造影劑促進(jìn)細(xì)胞轉(zhuǎn)染的體外實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｊ降慕ⅰＵ撐亩芯苛顺曉煊皠┙閷?dǎo)PTEN基因轉(zhuǎn)染人卵巢癌細(xì)胞及其相關(guān)特性。論文三探討了超聲造影劑介導(dǎo)PTEN基因轉(zhuǎn)染對人卵巢癌細(xì)胞體外粘附、遷移和

2、侵襲影響的研究。并對相應(yīng)的作用機(jī)制進(jìn)行了初步探討，試圖為進(jìn)一步的超聲治療卵巢癌體內(nèi)試驗(yàn)研究提供依據(jù)，并為卵巢癌治療提供新的思路。 目的：探討超聲介導(dǎo)造影劑微泡破裂法促進(jìn)外源性基因定向轉(zhuǎn)移的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｊ剑云跒槟[瘤的基因治療研究提供新思路。 結(jié)果在目的基因轉(zhuǎn)染過程中，轉(zhuǎn)染方法對靶細(xì)胞的安全性是實(shí)驗(yàn)首先考慮的因素。通過不同實(shí)驗(yàn)組以MTT法檢測不同超聲照射時(shí)間對細(xì)胞的殺傷作用，結(jié)果顯示：在超聲作用強(qiáng)度0.7W/cm<'2>，作用時(shí)間小

3、于60s，對靶細(xì)胞安全性較高，隨超聲照射時(shí)間延長，細(xì)胞存活率明顯下降。國外有關(guān)研究顯示，當(dāng)超聲功率大于0.6W/cm<'2>時(shí)，目的基因在靶細(xì)胞才能有效表達(dá)。所以，本實(shí)驗(yàn)設(shè)定超聲參數(shù)為：超聲波強(qiáng)度0.7W/cm<'2>，作用時(shí)間30s。當(dāng)超聲強(qiáng)度為0.7W/cm<'2>，MI為1.0，作用時(shí)間30秒時(shí)，檢測體外培養(yǎng)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)組存活率是70.01％，通過組間對照細(xì)胞活性無明顯影響，隨著超聲照射時(shí)間的延長，細(xì)胞存活率明顯下降；造影劑濃度是10