創(chuàng)復(fù)康噴劑抗感染及對大鼠創(chuàng)傷感染模型的IL-1β和TNF-a影響研究.pdf

1、目的：通過觀察創(chuàng)復(fù)康噴劑在體外對常見創(chuàng)傷感染細菌的抑殺作用，對小鼠腹腔吞噬細胞的吞噬功能的促進作用，為臨床應(yīng)用于抗感染提供理論支持；對制備SD大鼠背部全層皮膚切除感染模型后創(chuàng)傷修復(fù)中的抗炎因子白介素1β(IL-1β)和腫瘤壞死因子α(TNF-α)表達的影響，旨在從分子生物學(xué)角度探討創(chuàng)復(fù)康噴劑對創(chuàng)傷修復(fù)作用的機制。
　　 方法：(1)本實驗以臨床創(chuàng)傷感染常見細菌為受試菌，采用打孔法，牛津杯法，連續(xù)倍比稀釋法，觀察創(chuàng)復(fù)康噴劑的最低抑

2、菌濃度和最低殺菌濃度。
　　 (2)創(chuàng)復(fù)康噴劑對吞噬細胞的影響實驗將健康昆明小鼠按隨機數(shù)字表隨機分為2大組，每大組中分實驗組，陽性對照組，陰性對照組，每組6只。于每只小鼠腹腔按組別分別注射創(chuàng)復(fù)康噴劑、0.1％雷大諾爾、生理鹽水各1ml，連續(xù)3天，在第4天按大組分別注射1ml雞紅細胞懸液和酵母菌，30分鐘后處死取腹腔液涂片，經(jīng)瑞姬氏染色后在顯微鏡下讀片，統(tǒng)計吞噬率和吞噬指數(shù).
　　 (3)創(chuàng)復(fù)康噴劑對背部全層皮膚切除感染模

3、型大鼠TNF-α和IL-1β影響的實驗將30只SD大鼠按隨機化原則隨機分為兩大組，每大組15只，再將每個大組分空白組，模型組，對照組，實驗組。
　　 于造模型成功后12小時分組外噴創(chuàng)復(fù)康噴劑、復(fù)方黃柏液、生理鹽水，生理鹽水5ml/次，每日2次，于168小時后選取一組，切取未愈合創(chuàng)面邊緣0.2cm的新生肉芽組織和皮膚，每只大鼠取約0.5g，超聲波粉碎后，制成組織勻漿，保存于-20℃冰箱中，待第二次288小時后取另一組標本；將制備好

4、的10％勻漿離心留上清液，采用放射免疫檢測TNF-α和IL-Lβ濃度。
　　 結(jié)果：(1)本方對金葡菌，銅綠假單胞菌和乙型溶血性鏈球菌作用較強，與對照組比較總體無顯著性差異；對銅綠假單胞菌怍用與青青霉素藥敏紙片比較有統(tǒng)計學(xué)意義：對金黃色葡萄球菌的MIC為31.5mg/ml，MBC為62.5mg/ml，對大腸埃希菌的MIC為62.5mg/ml，MBC為62.5mg/ml，對銅綠假單胞菌的MIC為31.5mg/ml，MBC為125m

5、g/ml,對乙型溶血性鏈球菌的MIC為15.62mg/ml.MBC為31.5mg/ml。
　　 (2)創(chuàng)復(fù)康噴劑能夠顯著影響小鼠腹腔巨噬細胞對雞紅細胞和酵母菌的吞噬功能，與雷夫諾爾相比較P＜0.05，有統(tǒng)計學(xué)意義，與空白對照組比較P＜0.01，有顯著統(tǒng)計學(xué)意義；由吞噬指數(shù)的統(tǒng)計結(jié)果可見，創(chuàng)復(fù)康噴劑能夠使巨噬細胞同時吞噬多個雞紅細胞或酵母菌.與霄夫諾爾組相比較P＜0.05.兩組間有統(tǒng)計學(xué)意義，與空白對照組比較P＜0.01，創(chuàng)復(fù)康噴

6、劑能夠促進小鼠腹腔巨噬細胞對異物和細菌的吞噬能力。
　　 (3)創(chuàng)復(fù)康噴劑對炎癥介質(zhì)TNF-、IL-1β的影響實驗結(jié)果表明實驗組和對照組與空白組分別比較，TNF-α、IL-1β的濃度含量明顯增多，在α=0.05下方差分析有顯著性差異；實驗組和對照組與模型組比較，經(jīng)方差分析，P＜0.05有統(tǒng)計學(xué)意義；模型組與空白組比較，P＜0.05，尚不能認為兩樣本無差異，實驗組與對照組比較TNF-α、IL-1β的濃度，P＞0.05，方差分析尚不

7、能認為兩樣本間有顯著性差異。表明運用創(chuàng)復(fù)康噴劑和復(fù)方黃柏液可以增加皮膚創(chuàng)傷感染過程中炎癥因子的濃度，具有調(diào)節(jié)的作用，能夠促進炎癥因子在創(chuàng)傷局部的表達。
　　 經(jīng)多樣本間的方差分析可知，TNF-α和IL-1β濃度具有同向性，變化相互影響。在第7天與12天具有相似性，兩次檢測同組的不同時間無顯著性差異，統(tǒng)計分析無意義，如：模型組在第7大和12大時腫瘤壞死因子濃度無明顯變化，無統(tǒng)計學(xué)意義。表明創(chuàng)復(fù)康噴劑與復(fù)方黃柏液能夠刺激局部創(chuàng)傷組織