低劑量砷染毒動(dòng)物腎臟損傷及差異蛋白質(zhì)研究.pdf

1、目的：1.探討低劑量亞慢性砷暴露對家兔腎臟功能影響。
　　 2.對低劑量砷暴露大鼠腎臟進(jìn)行蛋白質(zhì)組學(xué)研究，探討早期砷暴露的生物學(xué)標(biāo)志物。
　　 方法：1.選取健康雄性家兔12只，通過飲水砷對成年家兔進(jìn)行染毒，分低、中、高(10、50和250μg/L)三個(gè)劑量組和一個(gè)對照組，染毒組給予含亞砷酸鈉的自來水，對照組給予自來水，標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng)12周。分別于染毒8周和12周時(shí)在家兔耳緣靜脈采外周血，用比色法檢測其腎臟功能(肌酐、尿素

2、氮)；并用氫化物發(fā)生原子熒光光譜法測定其血砷以及肝腎組織砷含量；12周處死家兔，收集腎臟組織，光鏡觀察腎臟的形態(tài)學(xué)改變。
　　 2.選取健康雄性SD大鼠48只，隨機(jī)分為四組，每組12只，即對照組(0μg/L)，低劑量染毒組(50μg/L)，中劑量染毒組(150μg/L)，高劑量染毒組(450μg/L)。染毒4周后處死大鼠，取其腎臟運(yùn)用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)(雙向凝膠電泳)分離蛋白，凝膠經(jīng)掃描后用Pdquest圖形分析軟件對2-DE圖譜進(jìn)

3、行了分析，鑒定染毒SD大鼠和正常SD大鼠腎臟蛋白質(zhì)的差異表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 1.一般毒性：隨著時(shí)間的延長，家兔體重均有增長趨勢，但低劑量組體重增長率明顯高于其他組，但是體重的增長差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，有待于擴(kuò)大樣本量進(jìn)一步分析；隨著染毒劑量的增加，中、高劑量組腎臟砷含量明顯增高，并呈現(xiàn)一定劑量-反應(yīng)關(guān)系，與對照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 2.腎臟功能：隨著染毒劑量的增加，肌

4、酐含量有增加的趨勢，但尿素氮變化不明顯，各劑量組間均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　 3.光鏡觀察：對照組皮質(zhì)中腎小球結(jié)構(gòu)完整，腎小管分布規(guī)則。無變性壞死、炎性細(xì)胞浸潤及細(xì)胞脫落；低劑量組可見大量的炎性細(xì)胞浸潤；中劑量組髓質(zhì)看見高度淤血；高劑量組可見腎小管管腔擴(kuò)張，上皮扁平，有輕度的剝脫，淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞等慢性炎癥細(xì)胞的浸潤；遠(yuǎn)端腎小管及集合管內(nèi)有蛋白滲出形成的管型。本試驗(yàn)未觀察到腎小管、腎小球的變性和壞死。
　　

5、 4.雙向電泳：與對照組比較，各劑量組蛋白點(diǎn)的表達(dá)量均有不同程度的升高和降低，染毒組檢測到了4個(gè)對照組沒有的差異蛋白質(zhì)點(diǎn)，12個(gè)消失的蛋白質(zhì)點(diǎn)和21個(gè)上調(diào)、下調(diào)的蛋白質(zhì)點(diǎn)，有待于做進(jìn)一步的質(zhì)譜分析，以確定蛋白質(zhì)的種類和數(shù)量。
　　 結(jié)論：
　　 1.10μg/L砷有明顯促進(jìn)家兔體重增長的作用。
　　 2.中、高劑量組砷暴露可引起家兔腎臟砷蓄積及腎臟功能的損傷。
　　 3.家兔低劑量組出現(xiàn)了炎性細(xì)胞浸潤，高