苦參堿對類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎外周血淋巴細胞生長、細胞周期及IFN-γ、IL-4水平影響的研究.pdf

1、目的: 在體外實驗中，通過比較中藥苦參堿(Mat Matrine)與甲氨蝶呤(MTX Methotrexate)對類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者外周血淋巴細胞(PBL)生長、細胞周期及IFN-γ與IL-4分泌水平的影響，探討Mat對類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎PBL的作用機制。 方法: 1.分離純化外周血淋巴細胞，進行體外培養(yǎng)，選取MTX和Mat兩種藥物，各設(shè)6個濃度，其中0濃度為對照組。 2.應(yīng)用MTT比色法測定24小時和48小時的

2、MTX處理組、Mat處理組的吸光度值(A)，計算細胞抑制率。 3.應(yīng)用碘化丙啶(PI)染色流式細胞術(shù)(FCM)檢測48小時MTX處理組、Mat處理組的細胞周期； 4.應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA法)檢測MTX處理組、Mat處理組的IFN-γ與IL-4的分泌水平。 結(jié)果: 1.MTX、Mat均可抑制體外培養(yǎng)的PBL生長，隨著藥物濃度的增大，吸光度值(A)下降，細胞抑制率(IR％)增加，呈劑量依賴性。48

3、h作用點細胞抑制率(IR％)明顯大于24h作用點(P<0.001)。兩藥物比較無明顯差別(P>0.05)。 2.MTX、Mat均可使細胞周期構(gòu)成發(fā)生明顯變化，與對照組相比存在顯著差異(P<0.001)，G<,0>/G<,1>期細胞比例增高，S期和G<,2>/M期細胞比例降低。隨著藥物濃度增加，細胞增殖指數(shù)逐漸降低，呈劑量依賴性。兩藥物比較無明顯差別(P>0.05)。 3.MTX、Mat均可降低促炎因子IFN-γ分泌水平，

4、與對照組相比存在顯著差別(P<0.001)，但Mat組IFN-γ分泌水平降低幅度小于MTX組(P<0.001)。MTX、Mat組IL-4分泌水平與對照組無明顯差別(P>0.05)。 結(jié)論: 1.Mat抑制體外培養(yǎng)的RA患者PBL生長的作用與MTX相當(dāng)。 2.Mat對PBL細胞周期的阻滯作用與MTX相當(dāng)。 3.與MTX相比，Mat可下調(diào)IFN-γ分泌水平，Mat作用弱于MTX。MTX、Mat對IL-4分泌水