貴農(nóng)6號(hào)小麥抗白粉病基因的分子標(biāo)記.pdf

1、小麥種質(zhì)貴農(nóng)6號(hào)是用中燕96-3（母本）與貴農(nóng)21（父本）為雜交親本，從F2開(kāi)始，運(yùn)用常規(guī)育種方法并結(jié)合分子標(biāo)記輔助選擇技術(shù)，嚴(yán)格按照矮稈、兼抗、優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)等標(biāo)準(zhǔn)對(duì)雜種后代進(jìn)行系統(tǒng)選育，經(jīng)多代選育而成的新種質(zhì)。本文運(yùn)用SCAR，SSR技術(shù)，采用分離群體分組分析法（BulkedSegregateAnalysis，BSA），對(duì)小麥抗病種質(zhì)貴農(nóng)6號(hào)抗白粉病基因進(jìn)行分子標(biāo)記，驗(yàn)證得出小麥貴農(nóng)6號(hào)含有抗白粉病基因Pm21，SCAR篩選出1條與抗白

2、粉病基因緊密連鎖的引物，并對(duì)抗病和感病群體進(jìn)行了驗(yàn)證。
　　1、以感病品種藁98143與抗病種質(zhì)貴農(nóng)6號(hào)雜交，對(duì)雜交后代242個(gè)單株F2分離個(gè)體和雙親，以小麥白粉病當(dāng)前流行生理小種315號(hào)接種進(jìn)行抗病性鑒定。結(jié)果其中的183個(gè)單株表現(xiàn)抗病，59個(gè)單株表現(xiàn)感病，卡方（χ2）測(cè)驗(yàn)表明，χ20=0.033<χ20.05，1=3.841，說(shuō)明F2群體的抗感分離比例符合3R:1S，初步確定貴農(nóng)6號(hào)白粉病抗性是由一對(duì)顯性基因控制。
　　

3、2、依據(jù)BSA方法建立抗病池和感病池，通過(guò)SCAR實(shí)驗(yàn)，引物Pm21D,E能在抗病親本貴農(nóng)6號(hào)和抗病池中擴(kuò)增出大小約為1265bp的標(biāo)記帶，而在感病親本藁98143和感病池中不能擴(kuò)增出該標(biāo)記帶，經(jīng)3次重復(fù)均能得出相同的結(jié)果。用F2分離群體進(jìn)行單株分析，結(jié)果抗病單株中均有此標(biāo)記，感病單株均無(wú)此標(biāo)記帶。說(shuō)明貴農(nóng)6號(hào)含有抗白粉病基因Pm21，Pm21基因目前已被定位于6VS染色體上。
　　3、用特異引物D-L,R對(duì)貴農(nóng)6號(hào)抗病親本與藁9

4、8143感病親本和抗病池感病池及雜交后代的F2代抗感單株進(jìn)行SCAR檢測(cè)。結(jié)果在貴農(nóng)6號(hào)和抗病池中都能擴(kuò)增出140bp標(biāo)記，而在感病親本和感病池中均缺乏該標(biāo)記，用F2分離群體進(jìn)行遺傳連鎖性分析，結(jié)果F2的183個(gè)抗病單株中有179個(gè)抗病單株有此標(biāo)記，其余4個(gè)抗病單株和及F2的59個(gè)感病單株均無(wú)此標(biāo)記，經(jīng)計(jì)算，標(biāo)記與抗病基因間的遺傳距離為2.12±0.015cM，說(shuō)明D-L,R的SCAR標(biāo)記與貴農(nóng)6號(hào)抗白粉病基因緊密連鎖，在雜交育種過(guò)程中