貴農(nóng)6號小麥抗白粉病基因的分子標記.pdf

1、小麥種質(zhì)貴農(nóng)6號是用中燕96-3（母本）與貴農(nóng)21（父本）為雜交親本，從F2開始，運用常規(guī)育種方法并結(jié)合分子標記輔助選擇技術(shù)，嚴格按照矮稈、兼抗、優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)等標準對雜種后代進行系統(tǒng)選育，經(jīng)多代選育而成的新種質(zhì)。本文運用SCAR，SSR技術(shù)，采用分離群體分組分析法（BulkedSegregateAnalysis，BSA），對小麥抗病種質(zhì)貴農(nóng)6號抗白粉病基因進行分子標記，驗證得出小麥貴農(nóng)6號含有抗白粉病基因Pm21，SCAR篩選出1條與抗白

2、粉病基因緊密連鎖的引物，并對抗病和感病群體進行了驗證。
　　1、以感病品種藁98143與抗病種質(zhì)貴農(nóng)6號雜交，對雜交后代242個單株F2分離個體和雙親，以小麥白粉病當前流行生理小種315號接種進行抗病性鑒定。結(jié)果其中的183個單株表現(xiàn)抗病，59個單株表現(xiàn)感病，卡方（χ2）測驗表明，χ20=0.033<χ20.05，1=3.841，說明F2群體的抗感分離比例符合3R:1S，初步確定貴農(nóng)6號白粉病抗性是由一對顯性基因控制。
　　

3、2、依據(jù)BSA方法建立抗病池和感病池，通過SCAR實驗，引物Pm21D,E能在抗病親本貴農(nóng)6號和抗病池中擴增出大小約為1265bp的標記帶，而在感病親本藁98143和感病池中不能擴增出該標記帶，經(jīng)3次重復(fù)均能得出相同的結(jié)果。用F2分離群體進行單株分析，結(jié)果抗病單株中均有此標記，感病單株均無此標記帶。說明貴農(nóng)6號含有抗白粉病基因Pm21，Pm21基因目前已被定位于6VS染色體上。
　　3、用特異引物D-L,R對貴農(nóng)6號抗病親本與藁9

4、8143感病親本和抗病池感病池及雜交后代的F2代抗感單株進行SCAR檢測。結(jié)果在貴農(nóng)6號和抗病池中都能擴增出140bp標記，而在感病親本和感病池中均缺乏該標記，用F2分離群體進行遺傳連鎖性分析，結(jié)果F2的183個抗病單株中有179個抗病單株有此標記，其余4個抗病單株和及F2的59個感病單株均無此標記，經(jīng)計算，標記與抗病基因間的遺傳距離為2.12±0.015cM，說明D-L,R的SCAR標記與貴農(nóng)6號抗白粉病基因緊密連鎖，在雜交育種過程中