雌激素缺乏—膽固醇過(guò)載對(duì)β淀粉樣蛋白的影響.pdf

1、中山大學(xué)碩士學(xué)位論文雌激素缺乏—膽固醇過(guò)載對(duì)β淀粉樣蛋白的影響姓名：程冠杰申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：人體解剖與組織胚胎學(xué)指導(dǎo)教師：汪華僑20080602中山大學(xué)碩士學(xué)位論文 雌激素缺乏一膽固醇過(guò)載對(duì)D 淀粉樣蛋白的影響1 材料和方法1 ．1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象、來(lái)源及分組實(shí)驗(yàn)用雌性S D 大鼠購(gòu)自廣東省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，共4 0 只，觀察其初始精神狀態(tài)和活力均良好，體重( 1 8 0 士3 ．2 9 ) 。 隨機(jī)分為五組：對(duì)照組( C o n t r

2、0 1 ) ，去卵巢組( O v x ) ，高膽固醇組( H C h 0 1 ) ，模型組( O v x + H C h 0 1 ) ，植物雌激素治療組( O v x +H C h o l + E ) ，每組8 只。大鼠經(jīng)去卵巢手術(shù)后恢復(fù)1 ．2 周開(kāi)始進(jìn)食高膽固醇飼料。高膽固醇飼料配方：膽固醇2 ％+ 豬油1 0 ％+ 膽酸鈉0 ．3 ％+ 普通鼠料粉8 8 ．7 ％。植物雌激素治療組給藥：2 5 0 l ag 金雀異黃酮( 溶于5

3、0 u l 二甲基亞砜) ，腹部皮下注射，每隔2 d 注射1 次，注射1 8 周。1 ．2M o r r i s 水迷宮行為學(xué)測(cè)試飼喂1 6 周后，每組隨機(jī)選出5 只鼠，行M o r r i s 水迷宮試驗(yàn)，以檢測(cè)行為學(xué)方面的變化。包括定位航行測(cè)試和空間探索測(cè)試。1 ．3 R T - P C R 檢測(cè)海馬A P P 、B A C E l 的m R N A 水平；夾心E L I S A 法檢測(cè)大鼠海馬腦勻漿的A [ 1 4 0 含量水迷宮

4、試驗(yàn)后休息一周，各組隨機(jī)選取5 只大鼠處死取雙側(cè)海馬，一側(cè)用來(lái)提總R N A ，做半定量R T - P C R 檢測(cè)A P P 、B A C E l 的m R N A 水平，另一側(cè)加8 倍腦組織質(zhì)量的裂解液勻漿，勻漿液室溫靜置3 - 4 h 待其充分裂解后，加B S A T ．D P B S 稀釋后，在4 ℃下1 6 0 0 0 轉(zhuǎn)離心2 0 m i n ，取上清。各個(gè)上清液用考馬斯亮藍(lán)方法測(cè)總蛋白濃度，然后調(diào)整各個(gè)樣品上清的總蛋白濃度