Effe of Progesterone on GABA transporter 1 and glutamate transporter 1 expression in the cerebral cortex of developing rast aft.pdf

1、目的:為了研究發(fā)育期大鼠反復驚厥后大腦皮質區(qū)γ-氨基丁酸轉運體1(γ-aminobutyric acid transport1，GAT-1)及谷氨酸轉運體2（glutamate transport1，GLT-1）的表達變化以及應用孕酮(Progesterone)干預后對兩者的具體影響，以期探索GAT-1與GLT-1在發(fā)育期驚厥性腦損傷發(fā)病過程中的作用以及孕酮發(fā)揮抗驚厥作用的可能機制。
　　 方法:生后(postnatal，PN)

2、7天的SD大鼠共72只，隨機分為三組:對照組、驚厥組、孕酮干預組，每組各24只大鼠，各組再隨機分為三個部分，分別于最后一次驚厥后(after recurrent seizures，ARS)1d、3d、7d斷頭取腦。其中驚厥組與孕酮干預組大鼠予以三氟乙醚反復吸入（連續(xù)6天，每天1次），分別于最后一次驚厥后1d、3d、7d斷頭取腦，分離大腦皮質，分別應用免疫組織化學染色及Western blot方法測定各組大鼠在不同時間點大腦皮質GAT-1

3、和GLT-1蛋白及mRNA的表達。
　　 結果:（一）免疫組織化學結果顯示:①在對照組中，GAT-1在、ARS-3d及ARS-7d三個時間點時免疫組織化學平均光密度（average optical density，AOD）值表達無明顯差異;反復驚厥后大鼠大腦皮質GAT-1免疫組化AOD值在各時間點的表達均較對照組明顯上調(P＜0.01)，組間差異不顯著;孕酮干預后大鼠大腦皮質GAT-1免疫組化AOD值較驚厥組明顯下調(P＜0.0

4、1)，組間差異不明顯;②在對照組中GLT-1免疫組化AOD值在ARS-1d、ARS-3d及ARS-7d三個時間點無顯著性差異;反復驚厥后GLT-1免疫組化AOD值在各時間點均較對照組明顯上調(P＜0.01）;孕酮干預后各時間點大鼠大腦皮質GLT-1免疫組化AOD值進一步上調，顯著高于驚厥組和對照組(P＜0.01)。
　　 (二)Western blot結果顯示:①在對照組中，ARS-1d、ARS-3d及ARS-7d大鼠大腦皮質內

5、GAT-1 mRNA表達無明顯差異(P＜0.01);反復驚厥后各組大鼠GAT-1 mRNA表達水平顯著上調(P＜0.01）;孕酮干預后GAT-1 mRNA表達水平在各時間點較驚厥組顯著下調(P＜0.01)，組間差異不顯著;②對照組中，ARS-1d、ARS-3d及ARS-7d時，大鼠大腦皮質GLT-1 mRNA表達無顯著性差異;反復驚厥后各組大腦皮質GLT-1 mRNA表達均較對照組明顯上調(P＜0.01)，組間差異不顯著;孕酮干預后各組

6、大鼠大腦皮質GLT-1 mRNA表達水平進一步上調，與驚厥組及對照組比較具有顯著差異(P＜0.01)。
　　 結論:
　　 (1)發(fā)育期大鼠反復驚厥能夠誘發(fā)大腦皮質區(qū)GAT-1及GLT-1表達的異常，兩者表達的失衡可能導致腦內興奮-抑制系統(tǒng)平衡紊亂，從而誘發(fā)發(fā)育期反復驚厥后腦損傷.
　　 (2)孕酮可能對發(fā)育期反復驚厥后所致大腦皮質區(qū)氨基酸轉運體系統(tǒng)具有調控作用，通過作用于GAT-1和GLT-1維系腦內興奮-抑制