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文檔簡介
1、本研究以四川盆地各地區(qū)盛花期大豆根瘤為樣品,用劃線分離方法獲得其內生細菌。應用16S rDNA PCR-RFLP、代表菌株16S rDNA序別分析等方法探究四川盆地大豆根瘤內生細菌遺傳多樣性,確定其系統(tǒng)發(fā)育地位;繼而以大豆材料,應用盆栽試驗篩選出具有促生能力的優(yōu)良菌株,對其產IAA、產鐵栽體、溶磷和固氮能力等促生特性進行了研究;并以豌豆、蠶豆和玉米為供試植物,盆栽試驗驗證了優(yōu)良菌株的際促生效果。獲得了以下結果:
1.從四川盆地
2、不同區(qū)域采集大豆根瘤材料中分離獲得130株內生細菌,16SrDNA PCR-RFLP分析中,供試菌株共形成了81個遺傳型,聚類分析將其分成了5個遺傳分支,顯示出豐富的遺傳多樣性。除菌株DA13-1外,其余菌株分屬于4個遺傳群,其中群Ⅰ為優(yōu)勢群,包含62個菌株,占到47.7%;其次為群Ⅳ、群Ⅲ和群Ⅱ,分別由40、17和10個菌株組成。
2.選取40個代表菌株,測定了16S rDNA序列,構建了代表菌株的系統(tǒng)發(fā)育樹,結果表明40個
3、代表菌株分屬于芽孢桿菌屬(Bacillus)、假單胞菌屬(Pseudomonas)、中華根瘤菌屬(Sinorhizobium)、慢生型大豆根瘤菌屬(Bradyrhizobium)和腸桿菌屬(Enterobacter)。以芽孢桿菌屬為優(yōu)勢菌群,包括B.subtilis, B.aryabhattai,B.methylotrophicus, B.simplex, B.idriensis和B.umilus等6個種,尤其以Bacillusmeth
4、ylotrophicu最多。其次為中華根瘤菌屬和假單胞菌屬為的細菌種群占優(yōu)勢。
3.以大豆為材料,盆栽試驗初步篩選出了12株對大豆具有促生作用的細菌,均具有分泌IAA能力,濃度為0.353-32.404μg/mL,菌株Enterobacter sp.D13-3的IAA產量最高,達32.404±0.002μg/mL;其次是菌株B.methylotrophicus DA8-1,IAA產量為11.282±0.006μg/mL;有7株
5、具有產鐵載體能力,鐵載體活性單位為7.35%-34.31%,菌株DA13-1、DB30-2和DB1-3產鐵載體能力較強,產鐵載體活性單位分別達到了34.31%、32.35%和31.37%;有11株具有溶磷能力,在濃度為5g/L Ca3(PO4)2的培養(yǎng)液中,有效磷含量可達4.26-10.6μg/mL;6株細菌包括3株根瘤菌,Enterobacter sp.DA10-3, Bacillus methylotrophicus DA8-1和P
6、seudomonas monteilii DB19-3表現(xiàn)出了自生固氮能力。
4.采用盆栽實驗研究了12個菌株對豌豆、蠶豆和玉米盆栽促生效果,結果顯示,大部分菌株對供試植物具有一定的促生效果。其中,DA8-1(B.methylotrophicus)和DA16-5(B.methylotrophicus)的促生效果較好,DA8-1對大豆、蠶豆和豌豆都具有促生作用,DA16-5對大豆、蠶豆和玉米均表現(xiàn)出較好促生效果。接種后土壤養(yǎng)分明
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