越橘離體培養(yǎng)倍性育種研究.pdf

1、本試驗(yàn)對(duì)越橘花藥愈傷組織的誘導(dǎo)方法和適宜的生長(zhǎng)條件進(jìn)行細(xì)致的摸索和研究，試驗(yàn)以越橘六個(gè)品種的花藥為試材進(jìn)行離體培養(yǎng)體系的研究，著重研究了越橘花藥離體培養(yǎng)中誘導(dǎo)愈傷組織脫分化過(guò)程中各因素對(duì)花藥愈傷組織形成的影響作用以及花藥愈傷組織再分化過(guò)程中增殖及分化的最佳培養(yǎng)基配方；同時(shí)也對(duì)秋水仙素誘導(dǎo)越橘組培苗莖段和已誘變植株倍性的純化進(jìn)行研究。其研究結(jié)果具體如下： 1、在越橘花藥愈傷組織脫分化過(guò)程中，環(huán)境條件對(duì)花藥愈傷組織的形成起到重要作用

2、，在研究光照對(duì)越橘花藥愈傷組織形成中，黑暗條件下有助于越橘花藥愈傷的產(chǎn)生，其花藥愈傷組織誘導(dǎo)率可達(dá)53.33％；不同低溫處理時(shí)間對(duì)越橘花藥愈傷組織誘導(dǎo)的作用不是十分明顯，其中不經(jīng)過(guò)低溫處理和進(jìn)行4℃低溫處理1天有利于越橘花藥愈傷組織的誘導(dǎo)，其誘導(dǎo)率最高可達(dá)80.13％。而不同的取材時(shí)間對(duì)越橘花藥愈傷組織的形成也有影響：花朵采集應(yīng)在盛花期，越橘宜在其進(jìn)入花期一周左右為最佳采集時(shí)期；采集花冠的長(zhǎng)寬比為2:1的花朵為最佳試材。 2、在

3、越橘花藥愈傷組織再分化過(guò)程中，對(duì)誘導(dǎo)激素的種類和配比進(jìn)行進(jìn)一步的研究，研究結(jié)果表明：WPM+6-BA0.5mg/L+2，4-D1.0 mg/L為最佳的培養(yǎng)基配方，其花藥愈傷組織增殖量可達(dá)1.6567g；在越橘花藥愈傷組織誘導(dǎo)過(guò)程中，2，4-D起著主導(dǎo)作用，在配以相同濃度不同的細(xì)胞分裂素后，其中CPPU對(duì)越橘花藥愈傷組織的增殖量影響較大，但使用CPPU花藥愈傷組織的長(zhǎng)勢(shì)狀況不如6-BA和KT混合使用和6-BA單獨(dú)使用的效果好。同時(shí)對(duì)培養(yǎng)基

4、的pH值進(jìn)行了研究，結(jié)果表明：pH值為5.50時(shí)對(duì)越橘花藥愈傷組織的增殖有明顯的作用，增殖量可達(dá)1.7885g；當(dāng)pH值低于5.0時(shí)有利于愈傷組織的長(zhǎng)勢(shì)，愈傷組織結(jié)構(gòu)致密。在越橘花藥愈傷組織增殖的研究中，以WPM+CTK1.0mg/L+IBA0.4mg/L和WPM+6-BA0.5mg/L+NAA0.25mg/L為最佳的增殖培養(yǎng)基配方，最有利于越橘花藥愈傷組織的增殖與分化。 3、利用秋水仙素對(duì)越橘兩個(gè)品種進(jìn)行誘導(dǎo)多倍體研究并進(jìn)行倍

5、性鑒定，結(jié)果表明： 莖段培養(yǎng)：“北陸”經(jīng)過(guò)秋水仙素浸漬法和藥劑培養(yǎng)基法處理后，能誘導(dǎo)出嵌合體的變異植株，浸漬法最好的組合是濃度為2.0mg/L的條件下處理24h，變異率最高達(dá)到32.50％；藥劑培養(yǎng)基法最好的處理方法是濃度為0.002％，變異率達(dá)到5％，對(duì)已誘變的“埃利奧特”同時(shí)也進(jìn)行秋水仙素浸漬法和藥劑培養(yǎng)基法處理，和“北陸”效果基本一致，也出現(xiàn)了四倍體變異細(xì)胞，但未見(jiàn)其他倍性細(xì)胞出現(xiàn)，可見(jiàn)加倍后的細(xì)胞可以通過(guò)多次繼代消失。