激發(fā)型CD28單抗參與的細胞因子誘導的殺傷細胞(CIK)及其對乳腺癌細胞的殺傷作用研究.pdf

1、蘇州大學學位論文獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所提交的學位論文是本人在導師的指導下，獨立進行研究工作所取得的成果。除文中已經注明引用的內容外，本論文不含其他個人或集體已經發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不含為獲得蘇州大學或其它教育機構的學位證書而使用過的材料。對本文的研究作出重要貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。本人承擔本聲明的法律責任。論文作者簽日期：絲!主：Z：望激發(fā)型CD28單抗參與的細胞因子誘導的殺傷細胞(CIK)及其對乳腺癌細胞

2、的殺傷作用研究中文摘要中文摘要細胞因子誘導的殺傷細胞(cytokineinducedkiller，CIK)是將人體(自體或異體)外周血單個核細胞在體外經多種細胞因子刺激后活化增殖的一群異質性細胞群。它具有增殖能力強、殺瘤活性高、抗瘤譜廣及不受MHC(majorhistocompatibilitycomplex，MHC)限制性等特點。特別是對術后清除微小轉移灶、防止擴散及復發(fā)，提高患者自身抗腫瘤免疫能力具有重要作用。CD28是表達于人類T

3、細胞以及部分NK細胞表面的重要分子，T細胞的CD28作為受體分子與抗原提呈細胞(antigenpresentingcell，APC)表達的B7分子結合介導T細胞活化所需的協同刺激信號，從而激發(fā)T細胞的增殖與發(fā)揮免疫效應。激發(fā)型的CD28抗體與CD28分子結合后可直接轉導細胞活化信號，進而促進細胞的增殖與發(fā)揮免疫效應。本研究旨在自行制備鼠抗人激發(fā)型CD28單抗的基礎上，聯合不同細胞因子體外誘導CIK細胞，分析該法誘導的CIK的增殖能力、表

4、型特征及對乳腺癌細胞株MCF7的殺傷作用，以期尋找安全、高效擴增CIK的新方案。第一部分鼠抗人激發(fā)型CD28單克隆抗體的制備及鑒定目的：制備鼠抗人激發(fā)型CD28單克隆抗體并鑒定其生物學功能。方法：將已建株的分泌鼠抗入激發(fā)型CD28單克隆抗體的雜交瘤細胞大量體外擴增，采用體內誘生腹水法制備單抗并經ProteinA親和層析分離純化。間接免疫熒光法鑒定單克隆抗體的效價，流式細胞術分析單克隆抗體對細胞膜型CD28分子的結合能力。結果：腹水形成率