大鼠薄型子宮內(nèi)膜模型的建立和鑒定.pdf

1、目的:探索宮腔注射無水乙醇建立大鼠薄型子宮內(nèi)膜實驗?zāi)Ｐ偷姆椒?并鑒定模型是否成立。
　　 方法:取性成熟未交配雌性具有動情周期的Sprague-Dawley(SD)大鼠25只,隨機(jī)分為兩組:對照組5只(10個子宮),實驗組20只(40個子宮)。對照組白宮角處注入生理鹽水,貯留5分鐘,實驗組白宮角處注入95％無水乙醇,分別貯留5分鐘、10分鐘。根據(jù)液體貯留時間不同,實驗組隨機(jī)分為5分鐘組、10分鐘組,各10只大鼠(20個子宮)。經(jīng)

2、過兩個動情周期后,取處于動情期大鼠的子宮,測量子宮內(nèi)膜厚度:若實驗組子宮內(nèi)膜厚度與對照組相比無變化或者子宮內(nèi)膜層完全壞死,則造模失敗。若子宮內(nèi)膜變薄,我們將內(nèi)膜變薄的子宮歸為造模組,對其HE染色后子宮內(nèi)膜組織形態(tài)學(xué)進(jìn)行進(jìn)一步觀察,并采用免疫組織化學(xué)法方法檢測角蛋白、波形蛋白、VEGF、ERQ的表達(dá),分析子宮內(nèi)膜形態(tài)學(xué)特點(diǎn)、子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞和間質(zhì)中細(xì)胞再生長情況以及VEGF、ERα表達(dá)情況是否符合薄型內(nèi)膜的特點(diǎn),從而鑒定模型是否成功建立。

3、
　　 結(jié)果:
　　 1.宮腔注射95％無水乙醇經(jīng)過兩個動情周期后,5分鐘組中,1只大鼠死亡,4個子宮的內(nèi)膜厚度恢復(fù)至正常,14個子宮的內(nèi)膜變薄;10分鐘組中,2只大鼠死亡,8只大鼠子宮內(nèi)膜層壞死或者子宮全層壞死。
　　 2.與對照組相比:造模組子宮壁全層明顯變薄,子宮內(nèi)膜層(764.1±100.2μmvs234.6±48.1μm,p＜0.01)較肌層更明顯,且未見明顯波浪形;腺體稀疏,部分腺腔膨大成囊狀,腺上皮

4、及腔上皮細(xì)胞呈低柱、立方甚至扁平狀;血管減少,部分管腔膨大。10分鐘組子宮內(nèi)膜層大部分為無細(xì)胞結(jié)構(gòu)區(qū)域,僅存少數(shù)細(xì)胞結(jié)構(gòu)輪廓;淺肌層甚至子宮全層壞死,肌層血管擴(kuò)張,內(nèi)可見血栓形成。
　　 3.造模組單位內(nèi)膜面積中角蛋白面積小于對照組(11.46±2.40％vs17.82±2.28％,p＜0.05),差異有統(tǒng)計學(xué)意義;造模組單位間質(zhì)面積中波形蛋白面積小于對照組(8.30±2.84％vs13.62±3.18％,p＜0.05),差異有