版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領
文檔簡介
1、性早熟是一種生長發(fā)育異常性疾病,男女兒童中該病的發(fā)病率約為0.6%.但真性性早熟的病因仍不清楚.該實驗應用分子生物學、免疫組織化學等實驗方法,在達那唑誘導的性早熟大鼠模型上,克隆和鑒定性早熟大鼠下丘腦差異表達的基因,并初步觀察了模型鼠和患兒外周血單個核細胞中差異基因的表達,以探討性早熟的發(fā)病機制和中藥治療性早熟的機理.實驗結果如下:1.5日齡雌性大鼠皮下注射達那唑后,大鼠陰門開啟和出現第一個性周期的時間分別為25.97±2.24天和32
2、.43±0.75天,比正常組的34.00±0.98天和41.26±2.35天及載體組的34.33±1.09天和40.00±0.19天均顯著提前(P<0.01);模型組大鼠出現第一個動情周期時,卵巢和子宮的臟器系數也分別比正常組和載體組的明顯增加(P<0.01).另外模型組大鼠陰道脫落上皮細胞的形態(tài)學周期性變化和正常成熟大鼠的相似.結果提示,達那唑可誘導雌性大鼠的性發(fā)育顯著提前,該模型是一種較理想的真性性早熟大鼠模型.2.應用隨機引物PC
3、R(RNA arbitrarily primed PCR,RAP-PCR)方法從達那唑誘導的性早熟模型大鼠下丘腦共分離得到5條差異表達基因的cDNA片段,其中包括生殖調控體系的關鍵分子GnRH的cDNA.該文應用Dot blot鑒定了GnRHmRNA在大鼠下丘腦的表達,發(fā)現模型組下丘腦GnRHmRNA的表達呈上調趨勢.另外一條差異表達基因,我們將其命名為IPP-1(idiopathic precocious puberty),Blast
4、檢索GeneBank發(fā)現,其與homo sapiens KIAA1538基因的同源性達84%,應用Dot blot和Northern blot分析發(fā)現,IPP-1mRNA在模型組大鼠下丘腦的表達下調.3.應用RT-PCR方法觀察到,滋阻瀉火中藥合劑可下調下丘腦GnRHmRNA和垂體GnRH受體mRNA的表達.應用免疫組織化學研究發(fā)現,滋阻瀉火中藥合劑可以誘導性早熟模型大鼠下丘腦GnRH免疫陽性細胞數增加,我們推測滋陰瀉火中藥合劑可能通過
5、抑制下丘腦GnRH的釋放,緩解提前啟動的下丘腦—垂體—性腺軸(hypothalamic-pituitary-gonad axis,HPGA)功能.另外,滋阻瀉火中藥合劑可顯著上調性早熟差異基因IPP-1的表達.提示滋阻瀉火中藥合劑可在分子水平通過調整異常的基因表達,使HPGA的異常功能趨于正常化.4.應用RT-PCR的方法觀察到,在大鼠及不同年齡和性早熟兒童外周血單個核細胞內均有GnRHmRNA的表達,模型組大鼠其表達增加,性早熟患兒(
6、n=2)外周血單個核細胞內GnRHmRNA的表達較正常發(fā)育兒童(4歲、6歲、8歲)有升高趨勢.我們推測外周組織細胞產生的GnRH可能通過旁分泌作用于垂體之外的組織細胞上的GnRH受體,調節(jié)卵巢卵泡的發(fā)育和性甾體激素的產生.雖然在外周血單個核細胞內觀察到了KIAA1538mRNA的表達,但兒童及大鼠各組之間表達水平無顯著差異.總之,兒童性早熟可能是一種涉及到基因調控和表達的疾病,滋阻瀉火中藥合劑可從分子水平,在多個層次調整異常的HPGA功
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 雌性性早熟大鼠下丘腦GABAA受體α亞基的表達及滋陰瀉火中藥合劑對其表達的影響.pdf
- 雌性性早熟大鼠腦內Kiss-1-GPR54的表達及滋陰瀉火中藥合劑對其表達的影響.pdf
- 滋陰瀉火中藥對達那唑性早熟模型大鼠下丘腦Ghrelin及其受體的影響.pdf
- 滋陰瀉火中藥為主治療女性特發(fā)性性早熟的臨床分析.pdf
- 基于芯片表達干旱響應差異基因的克隆和功能初步鑒定.pdf
- 胃癌相關幽門螺桿菌差異基因文庫的構建及差異基因篩選.pdf
- 糖尿病前期患者差異基因的篩選及鑒定.pdf
- 子癇前期胎盤組織差異表達基因的克隆和初步鑒定.pdf
- 菲律賓蛤仔附著變態(tài)過程中的差異基因表達與基因克隆.pdf
- 中藥復方總多糖對小鼠免疫功能的影響及小鼠相關差異基因的篩選.pdf
- 半滑舌鰨性腺差異表達基因的克隆鑒定與表達分析.pdf
- 口腔疣狀癌差異基因表達及蛋白質組差異分析的研究.pdf
- 毛白楊剝皮再生過程中基因表達差異及差異基因功能分析.pdf
- 滋陰瀉火方對雌性真性性早熟大鼠性腺軸及生長軸功能影響的實驗研究.pdf
- 暈船適應大鼠差異表達基因的篩選和鑒定.pdf
- 銅脅迫下天藍苜蓿共生根中差異基因的表達分析及功能鑒定.pdf
- 肝郁證模型大鼠海馬差異基因表達譜的研究.pdf
- 延邊黃牛背最長肌差異表達基因的克隆鑒定及特征分析.pdf
- 溫陽消飲法對胸腔積液大鼠胸膜差異基因表達影響的實驗研究.pdf
- 白念珠菌耐藥株的蛋白質組與基因表達譜分析及差異蛋白質與差異基因的識別鑒定.pdf
評論
0/150
提交評論