2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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1、性早熟是一種生長發(fā)育異常性疾病,男女兒童中該病的發(fā)病率約為0.6%.但真性性早熟的病因仍不清楚.該實驗應用分子生物學、免疫組織化學等實驗方法,在達那唑誘導的性早熟大鼠模型上,克隆和鑒定性早熟大鼠下丘腦差異表達的基因,并初步觀察了模型鼠和患兒外周血單個核細胞中差異基因的表達,以探討性早熟的發(fā)病機制和中藥治療性早熟的機理.實驗結果如下:1.5日齡雌性大鼠皮下注射達那唑后,大鼠陰門開啟和出現第一個性周期的時間分別為25.97±2.24天和32

2、.43±0.75天,比正常組的34.00±0.98天和41.26±2.35天及載體組的34.33±1.09天和40.00±0.19天均顯著提前(P<0.01);模型組大鼠出現第一個動情周期時,卵巢和子宮的臟器系數也分別比正常組和載體組的明顯增加(P<0.01).另外模型組大鼠陰道脫落上皮細胞的形態(tài)學周期性變化和正常成熟大鼠的相似.結果提示,達那唑可誘導雌性大鼠的性發(fā)育顯著提前,該模型是一種較理想的真性性早熟大鼠模型.2.應用隨機引物PC

3、R(RNA arbitrarily primed PCR,RAP-PCR)方法從達那唑誘導的性早熟模型大鼠下丘腦共分離得到5條差異表達基因的cDNA片段,其中包括生殖調控體系的關鍵分子GnRH的cDNA.該文應用Dot blot鑒定了GnRHmRNA在大鼠下丘腦的表達,發(fā)現模型組下丘腦GnRHmRNA的表達呈上調趨勢.另外一條差異表達基因,我們將其命名為IPP-1(idiopathic precocious puberty),Blast

4、檢索GeneBank發(fā)現,其與homo sapiens KIAA1538基因的同源性達84%,應用Dot blot和Northern blot分析發(fā)現,IPP-1mRNA在模型組大鼠下丘腦的表達下調.3.應用RT-PCR方法觀察到,滋阻瀉火中藥合劑可下調下丘腦GnRHmRNA和垂體GnRH受體mRNA的表達.應用免疫組織化學研究發(fā)現,滋阻瀉火中藥合劑可以誘導性早熟模型大鼠下丘腦GnRH免疫陽性細胞數增加,我們推測滋陰瀉火中藥合劑可能通過

5、抑制下丘腦GnRH的釋放,緩解提前啟動的下丘腦—垂體—性腺軸(hypothalamic-pituitary-gonad axis,HPGA)功能.另外,滋阻瀉火中藥合劑可顯著上調性早熟差異基因IPP-1的表達.提示滋阻瀉火中藥合劑可在分子水平通過調整異常的基因表達,使HPGA的異常功能趨于正常化.4.應用RT-PCR的方法觀察到,在大鼠及不同年齡和性早熟兒童外周血單個核細胞內均有GnRHmRNA的表達,模型組大鼠其表達增加,性早熟患兒(

6、n=2)外周血單個核細胞內GnRHmRNA的表達較正常發(fā)育兒童(4歲、6歲、8歲)有升高趨勢.我們推測外周組織細胞產生的GnRH可能通過旁分泌作用于垂體之外的組織細胞上的GnRH受體,調節(jié)卵巢卵泡的發(fā)育和性甾體激素的產生.雖然在外周血單個核細胞內觀察到了KIAA1538mRNA的表達,但兒童及大鼠各組之間表達水平無顯著差異.總之,兒童性早熟可能是一種涉及到基因調控和表達的疾病,滋阻瀉火中藥合劑可從分子水平,在多個層次調整異常的HPGA功

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