人端粒酶反義寡聚核苷酸對(duì)胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制.pdf

1、[目的]建立改良的端粒酶活性定量檢測(cè)方法,并以三種不同分化程度的胃癌細(xì)胞為研究對(duì)象,研究端粒酶活性在不同分化程度的胃癌細(xì)胞的表達(dá)情況.進(jìn)一步研究人端粒酶反義寡聚核苷酸(Antisenseoligodeoxinucleotideof humantelomerase,ASODN)對(duì)三種不同分化程度的胃癌細(xì)胞端粒酶活性及生長(zhǎng)的抑制作用,誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞凋亡的可能性及其機(jī)制,探討端粒酶反義寡聚核苷酸的抑制作用與胃癌細(xì)胞的分化程度間的關(guān)系;意在闡明反

2、義核酸對(duì)胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)有抑制作用,進(jìn)而證明該反義核酸抑制胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)的主要機(jī)制是抑制端粒酶活性和誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞凋亡,為端粒酶抑制劑治療胃癌提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)和研究依據(jù),探索胃癌治療的新方法.[方法]建立改良的胃癌細(xì)胞端粒酶活性定量檢測(cè)方法,運(yùn)用該方法測(cè)定三種不同分化程度的胃癌細(xì)胞(MKN-45、SGC-7901、MKN-28)的端粒酶活性表達(dá)情況;繼以特定的端粒酶反義寡聚核苷酸片段,在指定的作用時(shí)間和濃度等條件下作用于三種胃癌細(xì)胞,運(yùn)用改良的胃癌

3、細(xì)胞端粒酶活性定量檢測(cè)方法測(cè)定端粒酶反義寡聚核苷酸片段作用前后胃癌細(xì)胞的端粒酶活性;用臺(tái)盼藍(lán)染色法觀察胃癌細(xì)胞的活力;用倒置顯微鏡、電鏡、流式細(xì)胞儀和原位末端標(biāo)記(TUNEL)法觀察細(xì)胞凋亡情況.[結(jié)論]三種胃癌細(xì)胞均表達(dá)端粒酶活性,說(shuō)明端粒酶活性對(duì)于胃癌的診斷和治療有重要價(jià)值,端粒酶活性在三種不同分化程度的胃癌細(xì)胞中表達(dá)基本相近,表明端粒酶活性與胃癌細(xì)胞的分化沒(méi)有顯著相關(guān)性.端粒酶反義寡聚核苷酸能抑制胃癌細(xì)胞的生長(zhǎng),其抑制作用是濃度、