REM睡眠剝奪對小鼠海馬tau蛋白磷酸化的影響.pdf

1、目的:探討快速眼動睡眠剝奪(REMSD)對小鼠海馬tau蛋白磷酸化、磷酸化p38MAPK及GSK3β的影響。
　　方法:將32只8周齡SPF級雄性健康昆明小鼠隨機分為對照組、REMSD24h、REMSD48h及REMSD72h組。對照組置于普通籠中飼養(yǎng),REMSD組置于SD箱中飼養(yǎng),各組在開始實驗前先讓小鼠熟悉環(huán)境3d。在實驗后,迅速頸椎脫臼處死小鼠,取出腦組織經(jīng)固定、脫水及包埋之后做成石蠟切片,用HE染色法觀察各組小鼠海馬形態(tài)結

2、構的變化。利用免疫組織法觀察總tau蛋白(T-tau)、磷酸化tau蛋白(p-tau)、磷酸化p38絲裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)及糖原合成激酶-3β(GSK3β)在小鼠海馬組織的表達情況,并用Image-Proplus6.0圖像分析軟件測定平均光密度值(OD值)來反映各項指標表達的變化。
　　結果:HE染色顯示在光鏡下對照組海馬內神經(jīng)元均勻分布,形態(tài)規(guī)則,排列致密、整齊,細胞核結構清楚,核內染色質清晰可見,呈藍色;RE

3、MSD組中,剝奪睡眠24h后海馬內神經(jīng)元結構即發(fā)生改變,細胞排列欠整齊,REMSD72h組細胞結構損傷較明顯,細胞排列疏松,部分細胞呈萎縮狀,胞漿呈嗜酸變性,細胞核結構不清,染色質顆粒欠清晰,部分神經(jīng)元胞漿減少、細胞核固縮濃染。免疫組化結果顯示,無論對照組或是REMSD組,T-tau平均OD值均無明顯差異。對照組、REMSD24h、48h及72h組小鼠海馬p-tau平均光密度(OD值)分別為0.104?0.007、0.156?0.027

4、、0.180?0.030和0.188?0.032(P<0.05),REMSD各組均高于對照組,差異有統(tǒng)計學意義;p-p38MAPK平均OD值分別為0.169?0.028、0.209?0.020、0.239?0.017和0.266?0.035(P<0.05),REMSD各組均高于對照組,且隨著時間的延長平均OD值也增加;GSK3β平均OD值分別為0.084?0.009、0.090?0.008、0.103?0.011與0.117?0.013