基于溫敏高分子材料的多組分化學(xué)發(fā)光檢測方法研究.pdf

1、復(fù)旦大學(xué)碩士學(xué)位論文基于溫敏高分子材料的多組分化學(xué)發(fā)光檢測方法研究姓名：周暘申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：藥物分析指導(dǎo)教師：盧建忠20070501碩士論文?一一基于溫敏高分子材料的多組分化學(xué)發(fā)光檢測方法研究摘要多組分同時(shí)檢測定量是目前蛋白質(zhì)、基因序列等大分子化合物分析檢測的熱點(diǎn)，尤其是在臨床診斷、環(huán)境監(jiān)測等領(lǐng)域。相對于單一組分分析，多組分同時(shí)分析測定具有樣品需求量少，分析時(shí)間短，重復(fù)步驟少，費(fèi)用相對低等優(yōu)點(diǎn)，受到越來越多人的關(guān)注。近年來，該領(lǐng)

2、域的科學(xué)家主要著力于多標(biāo)記的多組分檢測方法的發(fā)展，例如多種酶，金屬，熒光標(biāo)記等。但是這些方法由于標(biāo)記物有限，限制了多組分檢測方法的拓寬和發(fā)展。本文建立了基于溫敏高分子的多組分同時(shí)檢測分析的方法，突破了目前許多方法需要多種標(biāo)記物的局限性，將高分子材料、磁珠、聚苯乙烯微球作為三種生物大分子載體。由于三者具備特殊的分離特性，既可以通過加熱離心分離，又可以通過磁場，常溫離心，加熱離心將三者分開，從而實(shí)現(xiàn)三組分同時(shí)檢測。并將該方法應(yīng)用于蛋白質(zhì)、D

3、 N A 兩種生物大分子檢測中，實(shí)驗(yàn)結(jié)果驗(yàn)證了方法的可行性。( 1 ) 溫敏高分子材料的合成及性質(zhì)的探索；完成了蛋白質(zhì)、D N A 修飾的高分子材料合成，并考察了其對大分子物質(zhì)的非特異吸附性，驗(yàn)證了多組分檢測的可行性。( 2 ) 建立了雙組分I g G 和l e a 同時(shí)檢測方法：利用高分子及磁珠的分離特性，成功地達(dá)到了單一標(biāo)記同時(shí)檢測目的，且用靈敏度高的辣根過氧化氫酶( H R P ) 化學(xué)發(fā)光檢測，檢測靈敏度分別達(dá)到了2 ．0n g

4、 ／m l 和1 ．5n g ／r n l 。考察了該方法的天問天內(nèi)精密度，兩組分均具有1 1 ％左右的重現(xiàn)性，與傳統(tǒng)的酶聯(lián)免疫反應(yīng)相當(dāng)。我們將該方法應(yīng)用于4 0 多個(gè)人體血清樣本中1 9 0 和I g A 的檢測，結(jié)果顯示該方法檢測結(jié)果與臨床檢驗(yàn)結(jié)果相關(guān)性良好。( 3 ) 建立了三組分乙肝基因序列同時(shí)檢測方法：在雙組分成功檢測的基礎(chǔ)上。我們引入了聚苯乙烯微球，利用三種不同載體各自特性的差別實(shí)現(xiàn)了三組分同時(shí)檢測的目的。隨后采用鳥嘌呤特異