BP897對多發(fā)性抽動癥模型小鼠毒副作用的研究.pdf

1、多發(fā)性抽動癥(Tourette syndrome,TS)是一種慢性、病因未明的神經精神性疾病,患病率約0.05％～3.00％,近年來調查表明多發(fā)性抽動癥的發(fā)病率有所增高,所以越來越受到人們的關注。多發(fā)性抽動癥的癥狀主要分為運動性抽動(如眨眼、伸舌、搖頭、聳肩等)、發(fā)聲性抽動(如咳嗽聲、哼聲、清嗓聲、穢語等)常伴有行為問題(如強迫障礙、學習困難、睡眠障礙、自傷行為等)和認知功能障礙(如記憶缺陷、注意缺陷、感知覺缺陷等)。大量研究表明,中樞

2、神經系統(tǒng)功能異?？赡芘c多發(fā)性抽動癥有關,并提出相應的假說,其中最主要的是多巴胺系統(tǒng)功能失調假說。對多發(fā)性抽動癥的理想治療方法應當是生理-心理-社會醫(yī)學模式的三軸系統(tǒng)治療。目前多發(fā)性抽動癥的治療未見有突破性進展,治療原則仍然強調心理行為治療,并兼顧藥物治療。臨床使用的藥物主要為多巴胺受體阻滯劑,如氟哌啶醇、鹽酸硫比利等。氟哌啶醇有效率為70％-80％,但對行為問題療效較差,且具有嚴重的錐體外系反應(如急性肌張力障礙、靜坐不能、帕金森病樣震

3、顫),嗜睡、乏力等,約有20％～30％的患兒由于不能耐受副作用停止治療。目前臨床多采用副作用較輕的鹽酸硫必利治療,但療效不及氟哌啶醇。
　　 國內外研究表明運動激活效應由多巴胺D3受體介導,且能調控動物的本能運動。在所有多巴胺受體中D3受體親和力最高,主要分布在與運動功能無關的中腦邊緣區(qū),分布較其它受體更為集中。若成為多發(fā)性抽動癥的治療靶向,其產生的不良反應可能會比較少。我們篩選了多巴胺D3受體激動劑BP897(對D3受體的選擇

4、性是對D2受體的68倍,對D1、D4受體的結合力較低[3]),用多發(fā)性抽動癥模型小鼠研究其毒理作用,以尋找療效良好、副作用小的新型治療多發(fā)性抽動癥的藥物。
　　 目的:研究多巴胺D3受體激動劑BP897對多發(fā)性抽動癥模型小鼠肝臟、腎臟、腦組織、胃腸、血液、錐體外系等方面的影響,觀察探討B(tài)P897對靶器官的毒副作用,為臨床安全用藥提供動物實驗依據。
　　 方法:1.實驗分組:將72只ICR雄性小鼠隨機分為6組:正常對照組、

5、模型組、高劑量組(BP8973mg／kg)、中劑量組(BP8971mg／kg)、低劑量組(BP8970.3mg／kg),氟哌啶醇組(O.5mg／kg),每組12只。2.建立動物模型:參照Diamond等創(chuàng)立的神經毒素全身用藥法用亞氨基二丙腈連續(xù)腹腔注射7天建立多發(fā)性抽動癥小鼠模型,實驗第8天采用雙盲法對小鼠刻板行為進行評分。3.給藥途徑、方法:實驗第8天給予不同劑量的BP897、氟哌啶醇、生理鹽水灌胃給藥,1次／天,共28天。實驗第36

6、天留取高劑量組6只小鼠(恢復組),正常飼料喂養(yǎng)14天,觀察恢復期變化,余小鼠活殺解剖。4.檢測指標:記錄小鼠一般情況、周進食量、周體重、尿液生化檢測、強直性木僵時間、血液學檢測、臟器指數(shù)、肝臟、腎臟、腦組織、胃腸病理學檢查。
　　 結果:1、模型建立模型組、BP897高中低劑量組、氟哌啶醇組用亞氨基二丙腈連續(xù)腹腔注射7天后成功誘導多發(fā)性抽動癥小鼠模型。2、BP897對多發(fā)性抽動癥模型小鼠體重的影響 BP897連續(xù)灌胃給藥28天,

7、高、中、低劑量組與模型組小鼠相比體重明顯增長,中劑量組增長最為顯著。提示BP897高劑量(3mg／kg)可能影響小鼠體重增長。3、BP897對多發(fā)性抽動癥模型小鼠攝食量的影響 BP897連續(xù)灌胃給藥28天,中、低劑量組及模型組小鼠與高劑量組相比攝食量明顯增加,以中劑量組增加最為顯著。提示BP897高劑量(3mg／kg)可能對多發(fā)性抽動癥模型小鼠消化系統(tǒng)有影響。4、BP897對多發(fā)性抽動癥模型小鼠尿生化的影響B(tài)P897連續(xù)灌胃給藥28天,

8、檢測小鼠尿中的肌酐、尿素、天門冬氨酸氨基轉移酶、丙氨酸氨基轉移酶。BP897高、中、低劑量組與模型組相比差異無統(tǒng)計學意義,高、中、低劑量組之間相比差異無統(tǒng)計學意義。提示BP897對多發(fā)性抽動癥模型小鼠肝腎功能無明顯影響。5、BP897對多發(fā)性抽動癥模型小鼠血液學的影響B(tài)P897連續(xù)灌胃給藥28天,檢測小鼠血中的紅細胞、白細胞、血紅蛋白、血小板。BP897高、中、低劑量組與模型組相比差異無統(tǒng)計學意義,高、中、低劑量組之間相比差異無統(tǒng)計學意

9、義。提示BP897對多發(fā)性抽動癥模型小鼠血液學無明顯影響。6、BP897對多發(fā)性抽動癥模型小鼠臟器指數(shù)的影響 BP897連續(xù)灌胃給藥28天,稱量肝臟、腎臟、腦組織、心臟臟器濕重,計算臟器指數(shù)。高、中、低劑量組與模型組相比臟器指數(shù)差異無統(tǒng)計學意義,高、中、低劑量組之間相比臟器指數(shù)差異無統(tǒng)計學意義。提示BP897對多發(fā)性抽動癥模型小鼠重要臟器無明顯影響。7、BP897對多發(fā)性抽動癥模型小鼠錐體外系的影響氟哌啶醇與高、中、低劑量BP897灌胃

10、給藥28天后,氟哌啶醇(0.5mg／kg)與高、中、低劑量BP897相比誘導小鼠發(fā)生強直性木僵時間明顯延長,差異有統(tǒng)計學意義,BP897高、中、低劑量間誘導小鼠發(fā)生強直性木僵時間相比,差異無統(tǒng)計學意義。提示BP897誘導小鼠錐體外系反應較氟哌啶醇明顯減小。8、肝、腎、腦、胃腸粘膜病理切片檢查BP897連續(xù)灌胃給藥28天,HE染色,光鏡檢查高、中、低劑量組小鼠肝臟、腎臟、腦組織及腸粘膜病理切片病變率與模型組相比無明顯異差異。高劑量組部分小

11、鼠胃粘膜有輕度水腫、充血、炎細胞浸潤,與中、低劑量組及模型組相比病變率差異有統(tǒng)計學意義?；謴推?停藥14天)光鏡檢查恢復組小鼠胃粘膜無病理學改變。提示高劑量BP897(3mg／kg)對胃粘膜有輕度刺激,但損傷是可逆的。
　　 結論:BP897對肝臟、腎臟、腦組織毒副作用較小,對血液學無明顯影響,錐體外系反應小,高劑量雖對胃粘膜有輕微刺激,引起胃粘膜輕度炎性改變,但損傷是可逆的。所以BP897可能是一種有較好前景的新型多巴胺D3受