辛伐他汀和普羅布考對(duì)TNF-α誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、目的
　　 觀察TNF-α誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞凋亡現(xiàn)象，初步探討TNF-α等細(xì)胞因子在心力衰竭中的作用機(jī)制及心力衰竭發(fā)病機(jī)制中細(xì)胞因子與細(xì)胞凋亡之間的聯(lián)系，探討辛伐他汀(simvastain)和普羅布考(probucol)對(duì)TNF-α誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的影響。
　　 方法
　　 體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVES)，取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。1．按照TNF-α的干預(yù)濃度將細(xì)胞分成四組：對(duì)照組，lng/mlTNF-α

2、干預(yù)組，lOng/mlTNF-α干預(yù)組，25ng/mlTNF-α干預(yù)組，各組細(xì)胞干預(yù)12h后，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率；2．根據(jù)上一步的結(jié)果，選lOng/mlTNF-α為干預(yù)點(diǎn)分別干預(yù)細(xì)胞0h，12h，24h，48h后采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率；3．綜合前兩步實(shí)驗(yàn)結(jié)果，用lOng/mlTNF-α與不同濃度的辛伐他汀共同干預(yù)細(xì)胞，分為四組：lOng/mlTNF-α+0μmol/1辛伐他汀干預(yù)組，lOng/mlTNF-α+0.01μm

3、ol/1辛伐他汀干預(yù)組，lOng/mlTNF-α+0.1μmol/l辛伐他汀干預(yù)組，lOng/mlTNF-α+1.0μmol/1辛伐他汀干預(yù)組，各組干預(yù)12h后，用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率。4．綜合一二步實(shí)驗(yàn)結(jié)果，用lOng/mlTNF-α與不同濃度的普羅布考共同干預(yù)細(xì)胞，分為四組：lOng/mlTNF-α+0μmol/1普羅布考干預(yù)組，lOng/mlTNF-α+20μmol/1普羅布考干預(yù)組，lOng/mlTNF-α+40μmol/1

4、普羅布考干預(yù)組，lOng/mlTNF-α+80μmol/l普羅布考干預(yù)組，干預(yù)12h后，用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡率。
　　 結(jié)果
　　 (1)不同濃度的TNF-α分別干預(yù)內(nèi)皮細(xì)胞12h后，流式細(xì)胞術(shù)測(cè)得細(xì)胞凋亡率分別為：對(duì)照組(0.8l±0.25％)，干預(yù)組結(jié)果分別為(2.35±0.04％)，(4.54±0.32％)，(6.17±0.28％)，各組之間存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。(2)10ng/mlTNF-α干預(yù)細(xì)胞內(nèi)皮細(xì)胞不同

5、時(shí)間后，流式細(xì)胞術(shù)測(cè)得細(xì)胞凋亡率分別為，對(duì)照組(0.87±0.35％)，各干預(yù)組分別為(4.53±0.32％)，(7.45±1.97％)，(10.92±1.27％)，各組間存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。(3)lOng/mlTNF-α與不同濃度的辛伐他汀共同干預(yù)細(xì)胞12h后，流式細(xì)胞術(shù)測(cè)得細(xì)胞凋亡率分別為，對(duì)照組(4.46±0.53％)，各干預(yù)組分別為(1.38±0.12％)，(2.89±0.27％)，(3.65±0.08％)。各干預(yù)組與對(duì)照組之間存在

6、統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。(4)10ng/mlTNF-α與不同濃度的普羅布考共同干預(yù)細(xì)胞12h后，流式細(xì)胞術(shù)測(cè)得細(xì)胞凋亡率分別為對(duì)照組(4.60±0.64％)，各干預(yù)組為(2.61±0.18％)，(2.2l±0.22％)，(1.28±0.34％)。各干預(yù)組與對(duì)照組之間存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 結(jié)論
　　 (1) TNF-α可以誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡，且存在濃度依賴性和時(shí)間依賴性。(2)辛伐他汀可以抑制TNF-α誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞凋亡，但無(wú)濃度依賴