版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)
文檔簡介
1、西瓜(Citrullus lanatus)是夏季主要的消暑果品,具有很高的營養(yǎng)價值。由于西瓜本身是一種喜溫耐熱性作物,所以對低溫環(huán)境比較敏感。雖然在設(shè)施栽培中利用溫室大棚、地膜覆蓋等技術(shù)滿足西瓜生長所需適宜溫度,但仍會受到低溫的傷害,而且目前西瓜的耐冷性種質(zhì)資源十分匱乏,急需解決西瓜的耐冷性問題。在生理生化方面已有研究發(fā)現(xiàn)西瓜多倍體耐冷性強,但在分子水平上的研究鮮有報道。
本研究目的在于結(jié)合分子標記技術(shù)深入研究低溫脅迫前后不同
2、倍性西瓜的基因表達差異,以‘京欣1號’西瓜的母本‘83166’(二倍體)及其同源三倍體、四倍體為材料,應(yīng)用MSAP技術(shù)、cDNA-AFLP技術(shù)和熒光定量PCR檢測技術(shù)對低溫處理前后不同倍性西瓜基因表達差異進行研究,研究結(jié)果如下:
1.MSAP技術(shù)對低溫處理前后不同倍性西瓜基因組DNA進行分析。通過28對引物擴增共得到3534條譜帶,平均每對引物擴增出126條譜帶。就CCGG位點發(fā)生甲基化而言,不同倍體西瓜及低溫處理后材料均以發(fā)
3、生雙鏈DNA內(nèi)部甲基化比例最高,說明雙鏈DNA內(nèi)部甲基化是西瓜材料的主要形式。低溫處理前,不同倍性西瓜之間的全甲基化率、半甲基化率及總甲基化率差異均不顯著。低溫處理后,以半甲基化率差異最為明顯,其中二倍體、低溫處理后二倍體半甲基化率分別為12.8%、9.3%;三倍體、低溫處理后三倍體半甲基化率分別為15.3%、10.0%;四倍體、低溫處理后四倍體半甲基化率分別為14.8%、8.3%。用U檢測法分析,二倍體低溫處理前后半甲基化差異不顯著,
4、三倍體差異顯著,四倍體差異極顯著,與倍性呈正相關(guān)。對DNA甲基化模式的變化特征分析發(fā)現(xiàn),不同倍性西瓜低溫處理前后的甲基化模式大部分未改變,但也有部分位點甲基化模式進行了調(diào)整。低溫處理后二倍體、三倍體、四倍體發(fā)生去甲基化位點比例為18.4%、17.7%、17.8%,發(fā)生過甲基化比例為18.4%、17.0%、16.0%,說明不同倍性西瓜間的表觀遺傳變異機理有很大差別。選取13條差異帶與西瓜基因組數(shù)據(jù)庫比對有7條是西瓜基因組序列,經(jīng)BLAST
5、X比對分析發(fā)現(xiàn)這些基因與植物的生長發(fā)育、環(huán)境脅迫應(yīng)答、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等有關(guān)。
2.利用cDNA-AFLP技術(shù)分析低溫處理前后不同倍性西瓜的基因差異表達。通過26對引物擴增共得到1927條帶,其中二倍體、三倍體、四倍體的上調(diào)表達比例分別為48.2%、51.3%、58.6%,與倍性呈正相關(guān);二倍體、三倍體、四倍體的下調(diào)表達比例分別為51.8%、48.7%、41.4%,與倍性呈負相關(guān)。選取54條差異帶進行回收測序,經(jīng)BLAST比對分析這些
6、差異表達基因片段按功能可以分為7類,包括假定蛋白(25.9%),能量與代謝相關(guān)(31.5%),物質(zhì)運輸相關(guān)(5.6%),信號轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)(3.7%),DNA修飾相關(guān)(1.9%),逆境相關(guān)(1.9%)及未知蛋白(29.6%)。
3.利用熒光定量PCR檢測上調(diào)表達基因在西瓜內(nèi)的表達量發(fā)現(xiàn),低溫處理后乙酰輔酶A羧化酶的羧基轉(zhuǎn)移酶β亞基是對照材料中表達量的3.56倍、低溫處理后鋅指蛋白是對照材料中表達量的1.45倍、低溫處理后NADH脫氫
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 干旱脅迫下不同倍性水稻的生理差異及ABA相關(guān)基因表達比較.pdf
- 鹽脅迫下不同倍性水稻的生理差異比較.pdf
- 鎘脅迫下不同倍性鯽的抗逆性研究.pdf
- 低溫脅迫下不同耐寒性甘蔗節(jié)間生理生化特性及蛋白表達分析.pdf
- 低溫脅迫下不同竹生理生化及分子標記的研究.pdf
- 鹽脅迫條件下不同耐鹽棉花miRNA差異表達研究.pdf
- 不同果肉顏色西瓜LCYB基因差異表達分析.pdf
- 枇杷幼果在低溫脅迫下基因的差異表達.pdf
- 二氧化硫脅迫下擬南芥防御基因的差異表達及表觀遺傳調(diào)控機制研究.pdf
- 黑木相思遺傳多樣性及寒脅迫誘導(dǎo)差異表達基因的研究.pdf
- 低溫脅迫下不同百合的抗寒生理研究.pdf
- 不同倍性團頭魴分子遺傳差異研究.pdf
- 低溫脅迫對桂花生理生化及表觀遺傳修飾的影響.pdf
- 干旱脅迫下不同冬小麥品種形態(tài)及生理性狀差異.pdf
- NaCl脅迫下不同種源沙棗幼苗耐鹽性差異生理機制研究.pdf
- 不同倍性西瓜胚胎發(fā)育及西瓜組培玻璃苗細胞學(xué)研究.pdf
- 不同染色體倍性西瓜生理指標的測定和遺傳變異研究.pdf
- 不同倍性割手密遺傳多樣性及抗病分蘗基因多態(tài)性研究.pdf
- 紫花苜蓿在轉(zhuǎn)錄組水平響應(yīng)低溫脅迫的差異表達基因研究.pdf
- 低溫脅迫下嫁接西瓜的生理生化特性及相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子表達的研究.pdf
評論
0/150
提交評論