細(xì)胞凋亡及β-catenin基因在顱咽管瘤發(fā)病及預(yù)后中的意義探討.pdf

1、目的：探討顱咽管瘤發(fā)生發(fā)展中可能存在的凋亡調(diào)控機(jī)制及與預(yù)后的關(guān)系；探討顱咽管瘤發(fā)生發(fā)展中可能存在的遺傳學(xué)改變及其機(jī)制；研究影響顱咽管瘤預(yù)后的臨床因素。 方法：本研究分三部分：(1)采用光學(xué)顯微鏡、電子顯微鏡和nJNEL技術(shù)對(duì)50例顱咽管瘤組織中細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)特征進(jìn)行觀察，通過計(jì)算凋亡指數(shù)對(duì)腫瘤中的凋亡細(xì)胞數(shù)進(jìn)行定量分析，采用免疫組織化學(xué)技術(shù)，對(duì)Bcl-2、Bax基因在50例顱咽管瘤腫瘤組織細(xì)胞中的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)，計(jì)算Bc

2、l-2／Bax比值； (2)采用病例-對(duì)照研究方案，用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)β-catenin在顱咽管瘤細(xì)胞和對(duì)照組正常神經(jīng)細(xì)胞中的表達(dá)，應(yīng)用PCR、DHPLC和DNA測(cè)序等方法對(duì)不同病理類型的顱咽管瘤組織和對(duì)照組正常神經(jīng)組織進(jìn)行β-catenin基因(CTNBBl)外顯子3的突變進(jìn)行篩選和分析； (3)對(duì)顱咽管瘤患者的臨床資料進(jìn)行多因素分析。 結(jié)果：(1)顱咽管瘤組織切片在光鏡和電鏡下很少觀察到典型的凋亡細(xì)胞，凋亡指數(shù)低下

3、，不同病理類型和預(yù)后的顱咽管瘤之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(2)鱗狀乳頭型中凋亡抑制因子Bcl-2陽性表達(dá)率及強(qiáng)度弱于釉質(zhì)上皮型，復(fù)發(fā)組Bcl．2陽性表達(dá)強(qiáng)度強(qiáng)于非復(fù)發(fā)組。 (3)凋亡促進(jìn)因子Bax在顱咽管瘤細(xì)胞中不表達(dá)或弱陽性表達(dá)。在不同病理類型的顱咽管瘤中Bax表達(dá)的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而非復(fù)發(fā)組腫瘤細(xì)胞中Bax的表達(dá)強(qiáng)于復(fù)發(fā)組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(4)釉質(zhì)上皮型顱咽管瘤中Bcl-2／Bax比值明顯高于鱗狀乳頭型顱咽管瘤組，復(fù)發(fā)組尤其釉質(zhì)

4、上皮型顱咽管瘤中復(fù)發(fā)患者的Bcl-2／Bax比值明顯高于非復(fù)發(fā)組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(5)顱咽管瘤組β-catenin蛋白的異常表達(dá)率高于正常對(duì)照組，釉質(zhì)上皮型顱咽管瘤組β-catenin蛋白的異常表達(dá)率明顯高于鱗狀乳頭型顱咽管瘤組，復(fù)發(fā)組β-catenin蛋白的異常表達(dá)率明顯高于非復(fù)發(fā)組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(6)顱咽管瘤和正常神經(jīng)細(xì)胞中都存在CTNBBl外顯子3突變(Leu<'46>CTG→TTG)，但未改變編碼的氨基酸。顱咽管瘤

5、組CTNBBl外顯子3突變率與對(duì)照組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。釉質(zhì)上皮型顱咽管瘤中CTNBBl外顯子3突變率明顯高于鱗狀乳頭型。若將鱗形乳頭瘤型顱咽管瘤組患者和正常對(duì)照組患者合并，再與釉質(zhì)上皮型顱咽管瘤組CTNBBl外顯子3突變率相比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。復(fù)發(fā)組CTNBBl外顯子3突變率明顯高于非復(fù)發(fā)組。有CTNBBl外顯子3突變顱咽管瘤患者中β-catenin異常表達(dá)率明顯高于無突變顱咽管瘤患者。(7)不同病理類型的顱咽管瘤組間患者年齡

6、、腫瘤體積兩方面差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。病理類型與患者性別、腫瘤性質(zhì)、腫瘤有無鈣化，術(shù)前是否合并腦積水等因素?zé)o關(guān)。顱咽管瘤復(fù)發(fā)組與顱咽管瘤非復(fù)發(fā)組在腫瘤體積，手術(shù)切除程度兩方面的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而在性別、年齡、病理類型、腫瘤性質(zhì)、腫瘤有無鈣化和術(shù)前是否合并腦積水等方面的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論：凋亡抑制基因Bcl-2的過度表達(dá)及凋亡促進(jìn)基因Bax的表達(dá)減少導(dǎo)致的Bcl-2／Bax比值增大，凋亡減少，細(xì)胞生存期延長可能是釉質(zhì)上皮型

7、顱咽管瘤發(fā)生發(fā)展的機(jī)理之一。這種凋亡失控在鱗狀乳頭型顱咽管瘤發(fā)生中不起主要作用。Bcl-2／Bax比值可作為評(píng)價(jià)釉質(zhì)上皮型顱咽管瘤患者預(yù)后的指標(biāo)之一。釉質(zhì)上皮型顱咽管瘤的腫瘤細(xì)胞中存在CTNBBl外顯子3突變，這種突變可能導(dǎo)致β-catenin的異常表達(dá)。在釉質(zhì)上皮型顱咽管瘤的發(fā)生中，由β-catenin的異常表達(dá)激活的異常Wnt通路改變可能起到重要作用。同時(shí)CTNBBl外顯子3突變可能導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞β-catenin的異常表達(dá)，增加了腫