細胞凋亡及β-catenin基因在顱咽管瘤發(fā)病及預后中的意義探討.pdf

1、目的：探討顱咽管瘤發(fā)生發(fā)展中可能存在的凋亡調控機制及與預后的關系；探討顱咽管瘤發(fā)生發(fā)展中可能存在的遺傳學改變及其機制；研究影響顱咽管瘤預后的臨床因素。 方法：本研究分三部分：(1)采用光學顯微鏡、電子顯微鏡和nJNEL技術對50例顱咽管瘤組織中細胞凋亡的形態(tài)學特征進行觀察，通過計算凋亡指數對腫瘤中的凋亡細胞數進行定量分析，采用免疫組織化學技術，對Bcl-2、Bax基因在50例顱咽管瘤腫瘤組織細胞中的表達進行檢測，計算Bc

2、l-2／Bax比值； (2)采用病例-對照研究方案，用免疫組織化學技術檢測β-catenin在顱咽管瘤細胞和對照組正常神經細胞中的表達，應用PCR、DHPLC和DNA測序等方法對不同病理類型的顱咽管瘤組織和對照組正常神經組織進行β-catenin基因(CTNBBl)外顯子3的突變進行篩選和分析； (3)對顱咽管瘤患者的臨床資料進行多因素分析。 結果：(1)顱咽管瘤組織切片在光鏡和電鏡下很少觀察到典型的凋亡細胞，凋亡指數低下

3、，不同病理類型和預后的顱咽管瘤之間差異無統(tǒng)計學意義。(2)鱗狀乳頭型中凋亡抑制因子Bcl-2陽性表達率及強度弱于釉質上皮型，復發(fā)組Bcl．2陽性表達強度強于非復發(fā)組。 (3)凋亡促進因子Bax在顱咽管瘤細胞中不表達或弱陽性表達。在不同病理類型的顱咽管瘤中Bax表達的差異無統(tǒng)計學意義，而非復發(fā)組腫瘤細胞中Bax的表達強于復發(fā)組，差異有統(tǒng)計學意義。(4)釉質上皮型顱咽管瘤中Bcl-2／Bax比值明顯高于鱗狀乳頭型顱咽管瘤組，復發(fā)組尤其釉質

4、上皮型顱咽管瘤中復發(fā)患者的Bcl-2／Bax比值明顯高于非復發(fā)組，差異均有統(tǒng)計學意義。(5)顱咽管瘤組β-catenin蛋白的異常表達率高于正常對照組，釉質上皮型顱咽管瘤組β-catenin蛋白的異常表達率明顯高于鱗狀乳頭型顱咽管瘤組，復發(fā)組β-catenin蛋白的異常表達率明顯高于非復發(fā)組，差異均有統(tǒng)計學意義。(6)顱咽管瘤和正常神經細胞中都存在CTNBBl外顯子3突變(Leu<'46>CTG→TTG)，但未改變編碼的氨基酸。顱咽管瘤

5、組CTNBBl外顯子3突變率與對照組相比，差異無統(tǒng)計學意義。釉質上皮型顱咽管瘤中CTNBBl外顯子3突變率明顯高于鱗狀乳頭型。若將鱗形乳頭瘤型顱咽管瘤組患者和正常對照組患者合并，再與釉質上皮型顱咽管瘤組CTNBBl外顯子3突變率相比較，差異有統(tǒng)計學意義。復發(fā)組CTNBBl外顯子3突變率明顯高于非復發(fā)組。有CTNBBl外顯子3突變顱咽管瘤患者中β-catenin異常表達率明顯高于無突變顱咽管瘤患者。(7)不同病理類型的顱咽管瘤組間患者年齡

6、、腫瘤體積兩方面差異有統(tǒng)計學意義。病理類型與患者性別、腫瘤性質、腫瘤有無鈣化，術前是否合并腦積水等因素無關。顱咽管瘤復發(fā)組與顱咽管瘤非復發(fā)組在腫瘤體積，手術切除程度兩方面的差異具有統(tǒng)計學意義。而在性別、年齡、病理類型、腫瘤性質、腫瘤有無鈣化和術前是否合并腦積水等方面的差異無統(tǒng)計學意義。 結論：凋亡抑制基因Bcl-2的過度表達及凋亡促進基因Bax的表達減少導致的Bcl-2／Bax比值增大，凋亡減少，細胞生存期延長可能是釉質上皮型

7、顱咽管瘤發(fā)生發(fā)展的機理之一。這種凋亡失控在鱗狀乳頭型顱咽管瘤發(fā)生中不起主要作用。Bcl-2／Bax比值可作為評價釉質上皮型顱咽管瘤患者預后的指標之一。釉質上皮型顱咽管瘤的腫瘤細胞中存在CTNBBl外顯子3突變，這種突變可能導致β-catenin的異常表達。在釉質上皮型顱咽管瘤的發(fā)生中，由β-catenin的異常表達激活的異常Wnt通路改變可能起到重要作用。同時CTNBBl外顯子3突變可能導致腫瘤細胞β-catenin的異常表達，增加了腫