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1、目的:研究高濃度D-葡萄糖與人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)長(zhǎng)期孵育對(duì)內(nèi)皮型-氧化氮合酶(eNOS)活性、eNOS蛋白表達(dá)和eNOS蛋白糖基化水平的影響;以及生理濃度胰島素對(duì)高濃度葡萄糖的作用是否有預(yù)防效應(yīng).方法:利用同位素二步色譜法測(cè)定eNOS活性,利用蛋白免疫印跡增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光法(Western blot法)檢測(cè)eNOS蛋白表達(dá)和eNOS蛋白糖基化水平,觀察不同濃度葡萄糖及葡萄糖加胰島素與HUVECs孵育不同時(shí)間后eNOS活性、eNO
2、S蛋白表達(dá)和eNOS蛋白糖基化水平的變化.結(jié)果:①基礎(chǔ)狀態(tài)下HUVECs eNOS部分激活,組胺明顯增加eNOS活性(P
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