E-cadherin及其連接蛋白基因表達(dá)與胃癌發(fā)生發(fā)展關(guān)系的研究.pdf

1、山東大學(xué)博士學(xué)位論文Ecadherin及其連接蛋白基因表達(dá)與胃癌發(fā)生發(fā)展關(guān)系的研究姓名：王彩霞申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：消化指導(dǎo)教師：袁孟彪2001.4.28作為原癌基因也參與Wnt信號傳導(dǎo)，是細(xì)胞粘附和Wnt信號傳導(dǎo)的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因素，與胃癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。盡管國外學(xué)者已就Ecadherin與胃癌分化程度、侵襲和轉(zhuǎn)移的相關(guān)性進(jìn)行研究，但是由于結(jié)果間的差異較大，因此粘附分子在胃癌發(fā)生發(fā)展中的重要性及機(jī)制仍不清楚，特別是與Catenins的

2、聯(lián)合研究資料很少，國內(nèi)缺少相關(guān)研究。有相當(dāng)一部分腫瘤Ecadherin呈正常膜表達(dá)，然而細(xì)胞問已經(jīng)喪失粘附并且異常分化。先前的研究幾乎都是單獨(dú)檢測Ecadherin在胃癌的表達(dá)，為進(jìn)一步探討Ecadherin、呂catenin、v—catenin的作用，并把它們作為一個(gè)功能單位評價(jià)它們與胃癌生物學(xué)行為的關(guān)系，本研究同時(shí)檢測三者在正常、腸化生、異型增生胃粘膜和胃癌組織中的表達(dá)，探索腫瘤發(fā)病機(jī)制，為臨床腫瘤的預(yù)防和治療提供新的思路。研究方法

3、應(yīng)用免疫組織化學(xué)sP方法，即應(yīng)用即用型鼠抗人Ecadherin單克隆抗體、即用型兔抗人OCatenin單克隆抗體、即用型羊抗人Y—catenin多克隆抗體及UtrasensitiveSP免疫組化試劑盒對60例胃癌、20例癌前病變(包括10例腸化生胃粘膜和1o例異型增生胃粘膜)、2o例正常組織進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色。以乳腺癌的陽性照片作為陽性對照，以PBS溶液分別代替一抗、二抗作為陰性對照。結(jié)果根據(jù)染色強(qiáng)度及染色定位進(jìn)行記分，判斷標(biāo)準(zhǔn)按照J(rèn)

4、awhari的方法：0分：表達(dá)基本消失；1分：細(xì)胞漿表達(dá)；2分：異質(zhì)性表達(dá)減弱(即含正常細(xì)胞膜染色，也含異常染色區(qū)域lo％以上)；3分：保留細(xì)胞膜表達(dá)。0、l和2分者均為異常表達(dá)。在同一個(gè)腫瘤內(nèi)染色方式常有變化，特別是當(dāng)分化程度不一致時(shí)，以主要染色區(qū)域?yàn)闇?zhǔn)。所得數(shù)據(jù)按資料類型進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，以尸o05為差異有顯著性意義。結(jié)果正常上皮細(xì)胞Ecadherin、0一catenin和YCatenin主要呈細(xì)胞膜表達(dá)，尤其是在細(xì)胞問表達(dá)。本組研究