稻水象甲共生菌Wolbachia中插入序列的克隆與鑒定.pdf

1、稻水象甲(鞘翅目象甲科)在我國是一種外來昆蟲，于上世紀80年代后期入侵我國。該蟲在北美原產地主營兩性生殖，兼營孤雌生殖，而在各入侵地均營孤雌生殖。孤雌生殖方式的形成是該蟲種群成功入侵并大規(guī)模擴散的重要原因。Wolbachia是廣泛分布于節(jié)肢動物和寄生性線蟲體內的一類共生細菌，對宿主的生殖具重要的調控作用，其中包括引起雄性染色體的雌性化、孤雌生殖、雄性致死、細胞質不親和性等。前人研究已表明，稻水象甲成蟲中有Wolbachia這一類共生菌。

2、本研究對該象甲Wolbachia基因組中的插入序列進行了分離和鑒定，以期為今后研究Wolbachia在其孤雌生殖方式形成中的作用及其機制奠定基礎。 本研究從不同地理種群稻水象甲的Wolbachia基因組中擴增到了兩條IS3序列、兩條IS4序列、4條IS5序列。對這些插入序列進行分析，發(fā)現所獲得的兩個IS3序列即IS3-1278和IS3-1275之間同源性為75.4％，與果蠅體內Wolbachia的IS3序列同源性則分別為78％和

3、79％。而IS3-1278和IS3-1275編碼的氨基酸序列與GenBank中的同源氨基酸序列的同源性則較低，只在40％左右。 本實驗所獲得的兩個IS4序列即IS4-1433與IS4-880之間同源性較低，只有30.4％，其中IS4-1433與果蠅體內的Wolbachia的IS4序列同源性高達86％，而IS4-880則沒有搜索到與之有較高同源性的序列。IS4-1433編碼的氨基酸序列與多種果蠅體內的Wolbachia中的IS4家

4、族的氨基酸序列同源性較高，基本分布在85％上下。所獲得的IS5序列中只有IS5-740編碼的氨基酸序列與多種果蠅體內的Wolbachia中的相關序列有50％左右的同源性。 從來自于不同地理種群的稻水象甲Wolbachia中所擴得的IS3、IS4序列有較大的差異性，經分析，稻水象甲原產地種群和入侵地種群可能感染了不同的Wolbachia，少部分種群可能同時感染了這兩種Wolbachia。由于稻水象甲在入侵地營孤雌生殖，為避免出現基