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文檔簡(jiǎn)介
1、柱花草(Stylosanthesspp.)是一種優(yōu)良的熱帶豆科牧草,對(duì)于中南美洲、亞洲和非洲來(lái)說(shuō)有重要的商業(yè)價(jià)值,然而,柱花草炭疽病的發(fā)生和流行限制了柱花草的進(jìn)一步利用。Mineirao柱花草是一種高度抗炭疽病的品種,已在巴西得到了大面積的推廣種植,但其抗病機(jī)理尚不清楚。 我們已經(jīng)對(duì)Mineirao柱花草的抗病機(jī)理進(jìn)行了初步研究,并用AFLP分子標(biāo)記技術(shù)從其基因組DNA中獲得了一特異片斷SG2950-1,利用快速擴(kuò)增cDNA末端
2、(RACE)技術(shù)將基因組DNA特異片段的兩端從Mineirao柱花草擴(kuò)增出來(lái),經(jīng)測(cè)序后拼接得到MSRA基因的全長(zhǎng)序列。 本研究將MSRA基因和植物表達(dá)載體通基因工程的方法構(gòu)建了植物表達(dá)載體pCAMBIA2301-MSRA,通過(guò)凍融法將該植物表達(dá)載體導(dǎo)入根癌農(nóng)桿菌LBA4404:以CIAT2312柱花草種子無(wú)菌萌發(fā)的幼苗為外植體,通過(guò)優(yōu)化該柱花草再生體系,建立了CIAT2312柱花草遺傳轉(zhuǎn)化體系;將含pCAMBIA2301-MSR
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