膀胱腫瘤微環(huán)境模擬平臺構建及實驗研究.pdf

1、目的：構建一個集膀胱腫瘤細胞、成纖維細胞、巨噬細胞、內皮細胞聯(lián)合培養(yǎng)的微流控平臺（芯片），以多種細胞聯(lián)合培養(yǎng)為基礎，實現(xiàn)體外狀態(tài)下膀胱腫瘤微環(huán)境模擬。在此基礎上對微環(huán)境中間質細胞的表型進行觀測，同時探究腫瘤對化療藥物敏感性。
　　方法：應用微流控技術構建一個由多個細胞培養(yǎng)室相互連通的微環(huán)境模擬平臺（芯片）。該平臺由基質膠灌注結構單元、細胞培養(yǎng)室及營養(yǎng)液灌流通道構成。膀胱腫瘤細胞及多種間質細胞分別接種于四個細胞培養(yǎng)室進行聯(lián)合培養(yǎng)。各

2、種細胞產生的可溶性細胞因子及代謝物可擴散至整個平臺。應用免疫熒光技術分別對成纖維細胞的α-SMA因子、內皮細胞的CD105因子及巨噬細胞的Arg-1因子的表達量進行檢測。依據(jù)膀胱腫瘤患者臨床化療方案，結合該微環(huán)境模擬平臺，檢測膀胱腫瘤細胞對不同化療藥物的敏感性差異。
　　結果：細胞形態(tài)學觀察顯示細胞在該平臺生長穩(wěn)定，膀胱腫瘤細胞在三維培養(yǎng)環(huán)境中出現(xiàn)環(huán)狀生長的趨勢。微環(huán)境模擬平臺中巨噬細胞在微橋中有遷移趨勢。與對照組相比，纖維細胞的

3、α-SMA因子高表達,內皮細胞的CD105因子高表達,巨噬細胞的Arg-1因子高表達?；谠撈脚_，膀胱腫瘤T24細胞經不同種類及不同配伍的化療藥物作用后，細胞死亡計數(shù)（每100個）有差異。
　　結論：本研究通過腫瘤細胞與多種間質細胞聯(lián)合培養(yǎng)，依托微流控技術，在體外環(huán)境下成功構建了膀胱腫瘤微環(huán)境模擬平臺。在該平臺中，微環(huán)境模擬狀態(tài)下間質細胞生物學表型有活化趨勢。該模擬平臺實現(xiàn)了膀胱腫瘤T24細胞對多種化療藥物作用敏感性的差異檢測，為