膀胱腫瘤微環(huán)境模擬平臺(tái)構(gòu)建及實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：構(gòu)建一個(gè)集膀胱腫瘤細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞聯(lián)合培養(yǎng)的微流控平臺(tái)（芯片），以多種細(xì)胞聯(lián)合培養(yǎng)為基礎(chǔ)，實(shí)現(xiàn)體外狀態(tài)下膀胱腫瘤微環(huán)境模擬。在此基礎(chǔ)上對微環(huán)境中間質(zhì)細(xì)胞的表型進(jìn)行觀測，同時(shí)探究腫瘤對化療藥物敏感性。
　　方法：應(yīng)用微流控技術(shù)構(gòu)建一個(gè)由多個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)室相互連通的微環(huán)境模擬平臺(tái)（芯片）。該平臺(tái)由基質(zhì)膠灌注結(jié)構(gòu)單元、細(xì)胞培養(yǎng)室及營養(yǎng)液灌流通道構(gòu)成。膀胱腫瘤細(xì)胞及多種間質(zhì)細(xì)胞分別接種于四個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)室進(jìn)行聯(lián)合培養(yǎng)。各

2、種細(xì)胞產(chǎn)生的可溶性細(xì)胞因子及代謝物可擴(kuò)散至整個(gè)平臺(tái)。應(yīng)用免疫熒光技術(shù)分別對成纖維細(xì)胞的α-SMA因子、內(nèi)皮細(xì)胞的CD105因子及巨噬細(xì)胞的Arg-1因子的表達(dá)量進(jìn)行檢測。依據(jù)膀胱腫瘤患者臨床化療方案，結(jié)合該微環(huán)境模擬平臺(tái)，檢測膀胱腫瘤細(xì)胞對不同化療藥物的敏感性差異。
　　結(jié)果：細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察顯示細(xì)胞在該平臺(tái)生長穩(wěn)定，膀胱腫瘤細(xì)胞在三維培養(yǎng)環(huán)境中出現(xiàn)環(huán)狀生長的趨勢。微環(huán)境模擬平臺(tái)中巨噬細(xì)胞在微橋中有遷移趨勢。與對照組相比，纖維細(xì)胞的

3、α-SMA因子高表達(dá),內(nèi)皮細(xì)胞的CD105因子高表達(dá),巨噬細(xì)胞的Arg-1因子高表達(dá)?；谠撈脚_(tái)，膀胱腫瘤T24細(xì)胞經(jīng)不同種類及不同配伍的化療藥物作用后，細(xì)胞死亡計(jì)數(shù)（每100個(gè)）有差異。
　　結(jié)論：本研究通過腫瘤細(xì)胞與多種間質(zhì)細(xì)胞聯(lián)合培養(yǎng)，依托微流控技術(shù)，在體外環(huán)境下成功構(gòu)建了膀胱腫瘤微環(huán)境模擬平臺(tái)。在該平臺(tái)中，微環(huán)境模擬狀態(tài)下間質(zhì)細(xì)胞生物學(xué)表型有活化趨勢。該模擬平臺(tái)實(shí)現(xiàn)了膀胱腫瘤T24細(xì)胞對多種化療藥物作用敏感性的差異檢測，為