肝大部分切除術(shù)后小鼠血漿蛋白質(zhì)組變化的初步研究.pdf

1、研究目的：運(yùn)用蛋白質(zhì)組學(xué)的方法對(duì)肝臟大部分切除術(shù)后小鼠的血漿進(jìn)行研究，觀察肝臟再生過程中血漿蛋白質(zhì)組學(xué)的動(dòng)態(tài)變化，對(duì)那些在再生過程中新增、丟失或濃度變化的蛋白質(zhì)進(jìn)行鑒定，以期尋找肝臟再生過程中重要的相關(guān)蛋白，為進(jìn)一步研究肝臟再生機(jī)制奠定基礎(chǔ)。 方法：以肝大部切除術(shù)制備小鼠肝臟再生模型。術(shù)后4個(gè)時(shí)間點(diǎn)(12h、24h、48h、72h)分別設(shè)立肝大部切除術(shù)組和假手術(shù)組，抽取血液，分離血漿，并對(duì)肝臟再生組織進(jìn)行組織學(xué)觀察。對(duì)血漿樣品去

2、除白蛋白后，行雙向凝膠電泳，所得膠圖經(jīng)銀染后以ImagemasterTM2DPlatinum軟件分析。發(fā)現(xiàn)的差異表達(dá)蛋白點(diǎn)，行膠內(nèi)消化，MOLDI-TOF-MS質(zhì)譜儀鑒定，數(shù)據(jù)庫(kù)搜索確定差異蛋白的性質(zhì)。 結(jié)果：經(jīng)分析發(fā)現(xiàn)有2個(gè)蛋白點(diǎn)在12h和24h切肝組恒定出現(xiàn)，而在假手術(shù)組中缺如；有2個(gè)點(diǎn)在切肝后12h和24h組表達(dá)上調(diào)；有1個(gè)點(diǎn)在切肝后12h、24h及48h組均表達(dá)上調(diào)。對(duì)這些蛋白點(diǎn)進(jìn)行膠內(nèi)消化、質(zhì)譜鑒定、蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)搜索，

3、發(fā)現(xiàn)3個(gè)表達(dá)上調(diào)的蛋白點(diǎn)是延胡索酰乙酰乙酸水解酶和兩個(gè)轉(zhuǎn)鐵蛋白片段。 結(jié)論：1.經(jīng)血漿2-DE凝膠分析發(fā)現(xiàn)，肝大部切除術(shù)后小鼠血漿蛋白質(zhì)組變化趨勢(shì)呈現(xiàn)單峰式曲線，變化高峰在12h和24h，至48h和72h變化趨于平緩；2.凝膠分析發(fā)現(xiàn)血漿蛋白質(zhì)組變化集中在肝大部切除術(shù)早期；3.鑒定所得的延胡索酰乙酰乙酸水解酶和兩個(gè)轉(zhuǎn)鐵蛋白片段有可能成為今后肝臟再生研究中的重要蛋白；4.本實(shí)驗(yàn)建立的小鼠肝臟再生的血漿蛋白質(zhì)組學(xué)研究平臺(tái)可用于其他肝