新型淀粉納米囊人工紅細胞有效性及安全性研究.pdf

1、背景:
　　研制出安全、有效的血液代用品是解決血源緊缺這一世界難題的根本途徑。血紅蛋白類氧載體采用可生物降解高分子材料包裹血紅蛋白,形成納米級的人工紅細胞。人工紅細胞因具有與天然紅細胞相似的核殼結(jié)構(gòu)及較長的體內(nèi)停留時間等優(yōu)點,被認為是最有研究前景的血紅蛋白類氧載體。
　　目的:
　　對新型淀粉納米囊人工紅細胞(NCAHbs)進行質(zhì)量控制;并對新型淀粉納米囊人工紅細胞的有效性及安全性進行初步評價。
　　方法:

2、>　　采用馬爾文粒度儀、透射電鏡、紫外分光光度計等方法,檢測不同批次的NCAHbs粒徑、包裹率、載藥量及穩(wěn)定性;采用大鼠重度失血性休克模型,比較不同類型復(fù)蘇液體對失血性休克大鼠血流動力學(xué)指標(biāo)及24h存活率的影響;測定NCAHbs復(fù)蘇后大鼠肺組織SOD活性及MDA含量,并采用序貫法測定NCAHbs半數(shù)有效量ED50;氰化高鐵血紅蛋白法測定NCAHbs的體內(nèi)停留時間T1/2。體外成纖維細胞培養(yǎng),MTT法檢測NCAHbs細胞毒性;通過大鼠尾靜

3、脈注射,檢測NCAHbs對血小板數(shù)目、凝血酶原時間的影響;初步研究NCAHbs的異常毒性及急性毒性,測定半數(shù)致死劑量LD50,觀察給藥后14d內(nèi)大鼠的臨床表現(xiàn)及重要器官的病理變化。
　　結(jié)果:
　　不同批次的NCAHbs透射電鏡顯示形態(tài)規(guī)則、分散均勻,平均粒徑為97.13±3.04nm,分散性PDI為0.039;馬爾文粒度儀顯示平均粒徑為163.57nm,PDI為0.03;平均表面Zeta電位為6.79mv;pH為7.34±

4、0.32,載藥量為60.72％±1.14%、包裹率為78.25%±0.98%;P50為29mmHg、Hill系數(shù)為2.5,20℃儲存一個月內(nèi)無血紅蛋白泄漏現(xiàn)象。NCAHbs能有效維持重度失血性休克大鼠的平均動脈壓,無顯著升壓不良反應(yīng),能減輕缺血再灌注性肺損傷,ED50為1.13g/kg,95%可信區(qū)間為0.64~1.69g/kg;在體內(nèi)半衰期為19.4~21.5h。NCAHbs無明顯細胞毒性,未出現(xiàn)血小板數(shù)目及凝血酶原時間異常;無異常毒