3種富EPA海洋微藻的誘變育種.pdf

1、為了獲得高產(chǎn)EPA的海洋微藻良種，本文以微綠球藻（Nannochloropsis oculata）、三角褐指藻（Phaeodactylum tricornutum）、新月菱形藻（Nitzschia closterium）為材料，研究了紫外誘變和NTG誘變對微藻的生長、總脂和脂肪酸的影響，篩選出優(yōu)良藻株，并對其進行生長、總脂和EPA的培養(yǎng)條件優(yōu)化。主要結(jié)果如下：
　　3種藻經(jīng)紫外輻射處理后，藻細胞的生長速率發(fā)生了不同程度的改變，從中

2、得到7株比出發(fā)株生長更快的誘變株。從生長速率、總脂含量和EPA含量綜合考慮，三角褐指藻的誘變株MP-2的改良較成功，其生長速率為（0.503±0.021），是出發(fā)株的1.12倍，總脂含量增加了23％，EPA含量也有所提高。
　　三角褐指藻誘變株MP-2的最適生長溫度為20℃，30℃為該藻的溫度閾值。該藻在20℃下總脂含量最高。15℃下EPA和PUFA含量最高，10℃下DHA含量最高。
　　誘變株MP-2在20~120μmol

3、/(m2·s)的光照范圍內(nèi)，光強為40μmol/(m2·s)生物量最大。低光照有利于該藻總脂的積累，在20和40μmol/(m2·s)光照條件下總脂含量最高。高光強有利于該藻EPA和DHA的積累，在100μmol/(m2·s)光照強度下，該藻細胞中EPA和DHA的含量均達到最高。
　　誘變株MP-2在鹽度25時，生長速率最高（0.447±0.013），在鹽度30和35下，該藻總脂含量顯著高于其它組，分別達到（36.66±1.07）

4、%和（36.54±1.32）%。鹽度25時DHA含量最高。
　　誘變株MP-2在氮濃度為20mg/L生長速率最大；在氮濃度30mg/L時藻的總脂含量最大。氮濃度達到25mg/L，PUFA和EPA含量達到最大。
　　誘變株MP-2在磷濃度2.5mg/L時生長速率最大；低磷利于該藻總脂的積累，磷濃度1.0mg/L時，總脂含量最高。磷濃度2.5mg/L，該藻EPA和PUFA含量顯著高于其它組。
　　誘變株MP-2的適宜鐵源是

5、FeSO4，鐵濃度為5.0 mg/L時生長速率最大。該藻的最佳產(chǎn)脂鐵濃度為2.5mg/L，鐵濃度10.0mg/L時，EPA和PUFA的含量均達到最大；缺鐵或低鐵條件下，該藻中EPA和DHA的含量為極低，甚至檢測不到，PUFA的含量也極低。
　　該藻無法以葡萄糖、乙酸鈉和甘油為碳源進行異養(yǎng)培養(yǎng)。
　　從生產(chǎn)角度而言，該藻培養(yǎng)在20℃，光照強度40μmol/(m2·s)，鹽度25，以20mg/L的KNO3為氮源，2.5mg/L的