受條銹菌侵染后小麥葉片中細(xì)胞壁降解酶活性變化的研究.pdf

1、本研究以不同小麥品種銘賢169，洛夫林13，水源11分別與不同條銹菌生理小種CY23，CY29，CY31，CY32構(gòu)成幾組親和與非親和組合，各組合均設(shè)健康葉片為對(duì)照，采集接種后不同時(shí)間點(diǎn)的葉片提取粗酶液，采用分光光度法對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)。 主要取得了一下成果： (1)明確了條銹菌細(xì)胞壁降解酶活性測(cè)定的條件：羧甲基纖維素酶(Cx)活性的測(cè)定條件為50℃，pH4.8，反應(yīng)時(shí)間30min，底物濃度為0.6％羧甲基纖維素鈉，以DNS法

2、測(cè)定，且失活酶液的滅活時(shí)間應(yīng)大于10min：β-葡萄糖苷酶(β-G)活性的測(cè)定條件為：50℃，pH4.8，反應(yīng)時(shí)間30min，底物濃度為0.5％水楊苷，以DNS法測(cè)定，且失活酶液的滅活時(shí)間應(yīng)大于15min；果膠酶活性的測(cè)定條件為：50℃，pH4.8，反應(yīng)時(shí)間1h，底物濃度為0.25％果膠，以DNS法測(cè)定，且失活酶液的滅活時(shí)間應(yīng)大于10min。 (2)研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)：在所有接種處理和未接種健康對(duì)照的小麥葉片中均可檢測(cè)到羧甲基纖維素酶

3、(Cx)、β-葡萄糖苷酶(β-G)及聚甲基半乳糖醛酸酶(PMG)三種細(xì)胞壁降解酶活性。在不同親和組合中，盡管健康對(duì)照及接種處理的酶活性在不同時(shí)間段有較大的變化，但接種處理的Cx、β-G、PMG三種酶活性在條銹菌侵染后48h-72h明顯高于對(duì)照，且差值在接種后48h或72h達(dá)到最大，比對(duì)照高29.6％～79.3％不等，經(jīng)方差分析，這種差異具有顯著性。此時(shí)恰好是吸器母細(xì)胞開(kāi)始大量形成之時(shí)，說(shuō)明細(xì)胞壁降解酶的分泌可能與吸器母細(xì)胞的形成有關(guān)，在

4、條銹菌穿透寄主細(xì)胞壁過(guò)程中具有一定的作用。 (3)在組合銘賢169-CY23，洛夫林13-CY29，水源11-CY31中，胞壁降解酶活性在168h后有明顯回升，經(jīng)方差分析具有顯著性。此時(shí)正逢夏孢子開(kāi)始大量產(chǎn)生，從而推測(cè)，細(xì)胞壁降解酶此時(shí)的作用是降解寄主細(xì)胞壁以獲取足夠的營(yíng)養(yǎng)供夏孢子產(chǎn)生。 (4)在洛夫林13-CY23構(gòu)成的非親和組合中，接種處理的酶活性在所有的時(shí)間點(diǎn)幾乎都低于健康對(duì)照，這與親和組合的酶活性變化趨勢(shì)完全不一