單核細(xì)胞增生性李斯特桿菌單克隆抗體的制備.pdf

1、近年來，微生物污染所造成的食源性疾病和潛在的健康危害已成為世界各國主要的公共衛(wèi)生問題．目前，我國食品中致病菌的檢測(cè)手段主要采用傳統(tǒng)的國標(biāo)方法，其檢測(cè)時(shí)間長、靈敏性不高，不利于食源性疾病的預(yù)防和控制，對(duì)我國消費(fèi)者的健康造成嚴(yán)重威脅。 本研究采用滅活后的單核細(xì)胞增生性李斯特桿菌全菌免疫雌性BALB/c小鼠，待小鼠尾靜脈全血效價(jià)達(dá)到1：10000以上，取其脾臟與SP2/0骨髓瘤細(xì)胞按常規(guī)方法進(jìn)行細(xì)胞融合，脾細(xì)胞與SP2/0骨髓癌細(xì)胞的

2、比例為8：1，經(jīng)間接ELISA方法進(jìn)行篩選，對(duì)強(qiáng)陽性單克隆孔進(jìn)行克隆，經(jīng)過5次有限稀釋法克隆后，共獲得4株能穩(wěn)定分泌單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株，分別命名為1B9、2C3、4D8和4H6，對(duì)其亞類進(jìn)行鑒定，分別為IgG1、IgG1、IgG2b和IgG1；四代腹水效價(jià)相差不大，說明分泌抗體能力比較穩(wěn)定；染色體鑒定，分別為104、106、103和107條染色體，符合雜交瘤細(xì)胞的特性；配對(duì)實(shí)驗(yàn)顯示1B9和2C3，4D8和1B9，4D8和2C3，4