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1、目的:探討羥甲基戊二酸單酰輔酶A(HMG-CoA)還原酶抑制劑辛伐他汀(Simvastatin,SV)對(duì)人急性早幼粒細(xì)胞白血病NB4細(xì)胞株和人急性單核細(xì)胞白血病SHI-1細(xì)胞株增殖與凋亡的影響以及對(duì)凋亡信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路PI3K/Akt和NF-κB通路相關(guān)基因mRNA表達(dá)的影響,以探討辛伐他汀抗白血病效應(yīng)及可能機(jī)制。
方法:以不同濃度辛伐他汀處理NB4細(xì)胞和SHI-1細(xì)胞,取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)分為陰性對(duì)照組和辛伐他汀處
2、理組(終濃度分別為5μmol/l、10μmol/l、15μmol/l),培養(yǎng)24h、48h、72h。采用MTT法觀察NB4細(xì)胞和SHI-1細(xì)胞增殖能力;流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定NB4細(xì)胞和SHI-1細(xì)胞凋亡指標(biāo)AnnexinV/propidiumiodide變化;PCR芯片研究SHI-1細(xì)胞PI3K/AKT通路和NB4細(xì)胞NF-KB通路相關(guān)基因mRNA的差異表達(dá)。
結(jié)果:辛伐他汀對(duì)NB4細(xì)胞和SHI-1細(xì)胞的生長(zhǎng)有明顯抑制作用和促凋
3、亡作用,且呈時(shí)間與劑量依賴性。(1)15μmol/l辛伐他汀處理NB4細(xì)胞24h、48h、72h細(xì)胞抑制率分別達(dá)到:45.75%、92.91%、96.46%,而細(xì)胞早期凋亡率分別為:30.25%、64.34%、87.38%。與對(duì)照組相比,15μmol/l辛伐他汀處理NB4細(xì)胞48h組中有56個(gè)基因表達(dá)發(fā)生改變,其中47個(gè)基因表達(dá)下調(diào)、9個(gè)基因表達(dá)上調(diào)。(2)15μmol/l辛伐他汀處理SHI-1細(xì)胞24h、48h、72h細(xì)胞抑制率分別達(dá)
4、到:26.82%、47.09%、63.92%,而細(xì)胞早期凋亡率分別為:5.75%、13.25%、15.59%。與對(duì)照組相比,5μmol/LSV組細(xì)胞早期凋亡率無(wú)明顯差異,即低濃度辛伐他汀對(duì)SHI-1細(xì)胞沒(méi)有凋亡誘導(dǎo)作用。但隨著藥物濃度增加,細(xì)胞的凋亡率明顯增加,且呈時(shí)間與劑量依賴性。15μmol/l辛伐他汀處理SHI-1細(xì)胞48h組中有39個(gè)基因表達(dá)發(fā)生改變,其中26個(gè)基因表達(dá)下調(diào)、13個(gè)基因表達(dá)上調(diào)。
結(jié)論:辛伐他汀能抑
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