角質(zhì)細(xì)胞生長因子（KGF）及其受體（KGFR）在口腔扁平苔蘚中的表達(dá).pdf

1、扁平苔蘚(LP)是一種伴有慢性淺表性炎癥的皮膚-粘膜角化異常性疾病。皮膚及粘膜可單獨(dú)或同時(shí)發(fā)病?？谇徊p稱為口腔扁平苔蘚(OLlP)是口腔粘膜病中最常見的疾病之一，部分病損可發(fā)生惡變，世界衛(wèi)生組織(WTO)將其列為可能的癌前狀態(tài)。其典型病理特征為上皮下淋巴細(xì)胞浸潤帶、上皮內(nèi)T細(xì)胞數(shù)量增多和基底上皮細(xì)胞液化變性。在臨床上可分為網(wǎng)紋型、丘疹型、斑塊型、水皰型、萎縮型和糜爛型6種。OLP的病因至今尚不十分清楚，目前認(rèn)為是一種T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反

2、應(yīng)，其病程慢性遷延，治療已成為臨床上一個(gè)相當(dāng)棘手的問題，目前還沒有治愈OLP的方法。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)角質(zhì)細(xì)胞生長因子(KGF)能特異性的促進(jìn)上皮細(xì)胞的增殖，而不作用于成纖維細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞，可用于治療因上皮細(xì)胞損傷引起的潰瘍，加速傷口的愈合。本實(shí)驗(yàn)通過免疫組化及原位雜交技術(shù)檢測(cè)正常口腔粘膜與口腔扁平苔蘚組織中KGF、KGFR蛋白及KGF mRNA的分布情況，以觀察KGF及其受體KGFR在口腔扁平苔蘚中的變化情況，探討其在口腔扁平苔蘚發(fā)生過程中的作

3、用及意義，為臨床上治療口腔扁平苔蘚提供新的思路。 方法： 1．收集臨床及病理確診的正常口腔粘膜10例及口腔扁平苔蘚粘膜30例，將每個(gè)標(biāo)本的七張連續(xù)切片分別進(jìn)行HE染色、免疫組化、原位雜交和陰性對(duì)照(3張)。根據(jù)免疫組化結(jié)果從蛋白水平觀察KGF和KGFR在兩種組織中的表達(dá)；根據(jù)原位雜交結(jié)果從分子水平觀察KGF在兩種組織中的表達(dá)情況。 2．對(duì)免疫組化及原位雜交的結(jié)果進(jìn)行圖像分析：切片輸人圖像分析系統(tǒng)，對(duì)表達(dá)強(qiáng)度進(jìn)行半

4、定量分析。每張切片計(jì)算5個(gè)高倍視野下總陽性細(xì)胞數(shù)，并取其均數(shù)；同時(shí)自切片染色的中心區(qū)域上下左右各選擇相同面積有代表性的區(qū)域，檢測(cè)平均光密度(OD)。 3．采用SPSS軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。KGF mRNA陽性細(xì)胞數(shù)及光密度值和KGF、KGFR蛋白光密度值，結(jié)果以均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)差(X±s)描述。顯著性檢驗(yàn)采用單因素方差分析，組問比較采用t檢驗(yàn)。P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果： 1、KGF免疫組化結(jié)果顯示：在正

5、?？谇徽衬ぶ校珜由掀ぜ?xì)胞的胞質(zhì)中均可見KGF陽性表達(dá)，KGF在基底層細(xì)胞胞質(zhì)中的表達(dá)較弱，呈陽性表達(dá)。在棘層細(xì)胞胞質(zhì)中表達(dá)明顯增加，呈強(qiáng)陽性表達(dá)。角化層也可見陽性著色。結(jié)締組織中，部分成纖維細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞的胞質(zhì)中可見KGF陽性表達(dá)；在口腔扁平苔蘚組織中，KGF在上皮細(xì)胞的表達(dá)與在正?？谇徽衬は嗨?，但染色強(qiáng)度較正?？谇徽衬p弱，陽性表達(dá)主要位于棘層細(xì)胞胞質(zhì)中。在基底層細(xì)胞胞質(zhì)中，KGF弱陽性表達(dá)。在結(jié)締組織中，也可見部分成纖維細(xì)胞及

6、血管內(nèi)皮細(xì)胞胞質(zhì)中KGF陽性表達(dá)，但染色強(qiáng)度較正常口腔粘膜減弱。 2、KGFR免疫組化結(jié)果顯示：在正?？谇徽衬ぶ校琄GFR在全層上皮細(xì)胞胞膜、部分細(xì)胞胞質(zhì)中陽性表達(dá)。KGFR在基底層的表達(dá)最強(qiáng)，呈強(qiáng)陽性表達(dá)。其余各層陽性表達(dá)均勻。結(jié)締組織中，部分血管內(nèi)皮細(xì)胞的胞膜和胞質(zhì)中可見KGFR陽性表達(dá)，成纖維細(xì)胞未見KGFR陽性表達(dá)；在口腔扁平苔蘚組織中，KGFR在上皮細(xì)胞的陽性表達(dá)主要位于棘層及基底層細(xì)胞胞膜和胞質(zhì)中。結(jié)締組織中，可見大

7、量的血管內(nèi)皮細(xì)胞陽性著色，染色程度較正?？谇徽衬ぴ鰪?qiáng)。成纖維細(xì)胞亦未見KGFR陽性表達(dá)。 3、免疫組化結(jié)果平均光密度檢測(cè)：與正?？谇徽衬そM相比，KGF在口腔扁平苔蘚上皮和間質(zhì)中的表達(dá)均降低，兩組問均存在顯著性差異；與正?？谇徽衬そM相比， KGFR在口腔扁平苔蘚組上皮中的表達(dá)降低，兩組間存在顯著性差異，而在間質(zhì)中的表達(dá)增強(qiáng)，兩組問存在顯著性差異。 4、原位雜交結(jié)果顯示：兩種組織的結(jié)締組織中部分成纖維細(xì)胞、部分血管內(nèi)皮細(xì)胞胞