磁性納米顆粒介導PTEN基因轉染對耐順鉑肺腺癌細胞生長及耐藥的影響.pdf

1、目的:評價聚乙烯亞胺（PEI）包裹的氧化鐵磁性納米顆粒polyMAG-1000介導野生型PTEN基因轉染的轉染效率、表達持續(xù)性及體系毒性。研究野生型PTEN基因轉染對耐順鉑肺腺癌A549/DDP細胞生長及耐藥的影響。 方法:1.以polyMAG-1000及脂質體分別介導野生型PTEN基因轉染A549/DDP細胞，通過熒光顯微鏡及流式細胞儀觀察轉染效率；通過RT-PCR、免疫細胞化學檢測轉染前后PTEN mRNA、蛋白的表達；以M

2、TT法觀察轉運體系的毒性。2.進一步以MTT法檢測PTEN基因轉染對A549/DDP細胞生長及耐藥的影響，以流式細胞儀觀察轉染后細胞周期及凋亡的變化。 結果:1.PolyMAG-1000介導的轉染其轉染效率（52.22±2.41）％明顯高于脂質體（32.15±3.13）％。RT-PCR結果顯示磁性納米顆粒介導組在轉染后5天內mRNA含量無明顯下降，脂質體介導組PTEN mRNA含量逐漸下降。PolyMAG-1000轉運系統(tǒng)在2μ

3、l/ml（v：v）濃度，4h作用時間無明顯的細胞毒性。2.野生型PTEN基因轉染A549/DDP細胞后2-6天其存活率下降；納米顆粒介導組生長抑制效應較脂質體轉染組更強。流式細胞分析可見野生型PTEN基因轉染細胞G0-G1期比例明顯增加，凋亡率增加。MTT法發(fā)現(xiàn)，A549/DDP細胞對順鉑的半數(shù)抑制濃度IC50為（193.8±21.3）μmol/L；經脂質體介導的野生型PTEN基因轉染A549/DDP細胞72小時后，細胞對順鉑的IC50

4、降為（120.3±11.5）μmol/L；而經磁性納米顆粒介導的野生型PTEN基因轉染72小時后，A549/DDP細胞對順鉑的IC50降為（72.8±10.9）μmol/L。 結論:1.磁性納米顆粒polyMAG-1000可介導野生型PTEN基因轉染A549/DDP細胞，其轉染效率明顯高于脂質體介導的轉染，且較之更加持續(xù)穩(wěn)定的表達。磁性納米顆粒轉運體系在轉染的劑量及作用時間下無明顯的細胞毒性。2.野生型PTEN基因轉染可抑制耐順